GW9662是一种选择性PPAR拮抗剂，作用于PPARγ，无细胞试验中IC50为3.3 nM，在细胞中作用于PPARγ比作用于PPARα和PPARδ的功能选择性强10到600倍。

靶点

体外研究

GW9662在PPARγ上结合Cys(285)，PPARγ是三种PPAR中保守的。GW9662是PPARγ拮抗剂，用于抑制脂肪细胞分化。GW9662抑制PPARγ激活，且抑制人乳腺癌肿瘤细胞系（MCF7, MDA-MB-468, MDA-MB-231）生长，IC50为20 μM-30 μM，说明 GW9662的PPARγ激动剂性能或PPARγ非依赖性生长抑制机制。Rosiglitazone(50 μM)与GW9662(10 μM)联用，作用于MDA-MB-231细胞，7天后，统计学上产生较低的存活细胞数。在原代鼠骨髓（BMs）和RAW264.7细胞中，PPARγ1配体能够抑制RANKL诱导的破骨细胞形成。重要的是，GW 9662(2 μM)可逆转这些配体的抑制作用，存在浓度依赖性。GW 9662(2 μM)作用于BMs，阻断IL-4对破骨细胞形成的抑制。GW 9662(1 μM) 作用于RAW264.7细胞，抑制NF-κB的RANKL激活。GW9662(10 μM)作用于甲状腺眼病患者的原代前脂肪细胞，抑制激素和激动剂诱导的脂肪细胞分化。

体内研究

LPS(1 mg/kg，腹腔注射)预处理大鼠，显著减弱肾损伤和功能障碍引起的缺血/再灌注（I/R）损伤的所有标记。最值得注意的是，GW9662(1 mg/kg，腹腔注射)，可废除LPS的保护作用。

T0070907

MB3709

GW0742

MB7303

GW501516

MB4844

L-165041

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.6143 mL

18.0714 mL

36.1428 mL

5 mM

0.7229 mL

3.6143 mL

7.2286 mL

10 mM

0.3614 mL

1.8071 mL

3.6143 mL

50 mM

0.0723 mL

0.3614 mL

0.7229 mL

结合实验:
人PPARα, PPARγ, 和 PPARδ 配体结合域 (LBDs) 在E. coli 中表达，作为聚组氨酸标记的融合蛋白。在实验缓冲液中，通过加入所需受体(15 nM)到链霉亲和素修饰的SPA珠(0.5 mg/mL)浆中，使受体固定在SPA珠上。混合物在室温下平衡至少1小时，然后在1×103g转速下将珠粒沉淀。除去上清液，轻轻混合，珠粒再悬浮于新鲜的实验缓冲液。重复离心/重悬浮步骤被，立即使用所得的受体包被的珠浆液，或贮存于4°C下长达1周再使用。使用[3H]GW2443作为放射性配体，分别测定与PPARα，PPARγ，PPARδ的竞争性结合。除非另有说明，所有实验缓冲液为50 mM HEPES (pH 7), 50 mMNaCl, 5 mM CHAPS, 0.1 mg/mL BSA, 和 10 mM DTT。一些实验中，使用50 mMTris (pH 8)替换HEPES(pH 7)。

细胞实验：

• Cell lines: MDA-MB-231细胞
• Concentrations: 10 μM
• Incubation Time: 10 天
• Method: MDA-MB-231按1×105细胞/25 cm3组织培养瓶的密度接种。24 小时后(第 0天), 使用含Rosiglitazone (50 μM), GW9662 (10 μM) 或两者都有的新鲜培养基置换生长培养基。对照烧瓶中为0.1％DMSO。通过胰酶消化，收集第0, 3, 5, 7, 10天的每种处理条件的细胞，使用台盼蓝染色，使用血球仪计算每瓶细胞总数和存活细胞数。

动物实验：

• Animal Models: 雄性Wistar大鼠
• Formulation: 10% (v/v) DMSO
• Dosages: 1 mg/kg
• Administration: 腹腔注射