LY2835219游离碱对CDK4和CDK6的IC50分别为2 nM和10 nM。

靶点

体外研究

LY2835219减少细胞生存能力的IC50值从0.5μM 0.7μM,抑制一种蛋白激酶和ERK信号而不是mTOR激活在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)细胞。LY2835219显示抑制A375R1-4,M14R,SH4R EC50值从0.3到0.6μM;LY2835219抑制亲代A375和耐药A375RV1和A375RV2细胞的增殖，具有类似的能力，IC50的值分别为395、260和463 nM。LY2835219抑制低纳米级的CDK4和CDK6，抑制Rb磷酸化，导致G1抑制和抑制增殖，其活性对Rb细胞是特异性的

体内研究

LY2835219 (45 mg/kg, p.o.)与everolimus结合，在HNSCC异种移植瘤中产生协同抗肿瘤作用。LY2835219(45或90 mg/kg, p.o.)在A375异种移植瘤模型中显示明显的肿瘤生长抑制。

LY2835219 mesylate

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.9740 mL

9.8699 mL

19.7398 mL

5 mM

0.3948 mL

1.9740 mL

3.9480 mL

10 mM

0.1974 mL

0.9870 mL

1.9740 mL

细胞（5×103）铺在96孔板中。 第二天将细胞处理24至48小时，然后按照制造商的说明书和发光平板读数器通过Caspase-Glo-3/7测定评估半胱天冬酶-3活性。

细胞实验

LY28 35219溶解在DMSO中，浓度为10毫米。
细胞接种在96孔板中，允许粘附过夜，并用DMSO控制（0.1% V/V）或所指示的化合物处理72小时。根据生产商的说明书，使用细胞计数试剂盒测定细胞活力和增殖。Ly235219和mTOR抑制剂之间的相互作用用CypSyn确定。组合指数（CI）值为1表示加性药物相互作用，而CI＜1是协同作用，CI＞1是拮抗作用。

动物实验

• LY28 35219在20毫米磷酸盐缓冲液中溶解在1% HEC中。
• 用OSC-19（1×106）细胞皮下注射六周龄BALB/c雌性裸鼠。当肿瘤大小达到约100平方毫米时，小鼠按肿瘤大小随机化，并进行各种治疗。每个治疗组至少包括5只小鼠。每组小鼠通过每日口服灌胃给药，LY28 35219（45 mg/kg/d或90 mg/kg/d），依维莫司（5 mg/kg/d），或两者的组合。LY28 35219溶解在1% HEC中，在20 mM磷酸盐缓冲液（PH2.0）中溶解。每周测量两次肿瘤大小和体重。肿瘤体积用以下公式计算：V＝（L×W2）/ 2。小鼠在第14天灌胃最后一次，第二天处死。取瘤组织进行Western blot和免疫组织化学染色。