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产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 噬菌体展示

Ph.D.-12 噬菌体展示肽库试剂盒

#E8110S 10 次淘选实验

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单独出售的组份

Ph.D.-12 Library
#E8111L         50 次淘选实验         ¥22,219

Ph.D.试剂盒组成

– 10 次独立淘选实验的足量噬菌体展示库,109 个克隆
– 28 gIII 测序引物(100 pmol)
– 96 gIII 测序引物(100 pmol)
– E. coli 宿主菌 ER2738
– 对照实验靶分子(链霉亲和素)和洗脱剂(生物素)
– 详细的使用手册
 建议测序引物序列(不单独提供)如下:
-28 gIII 测序引物 (22-mer)
5´d(GTATGGGATTTTGCTAAACAAC)3´
-96 glll 测序引物 (20-mer)
5´d(CCCTCATAGTTAGCGTAACG)3´

概述

噬菌体展示是一种体外筛选技术。它可以将一系列多肽或蛋白质文库展示在噬菌体颗粒的外部,而编码这些蛋白的 DNA 则位于病毒颗粒内部。利用展示蛋白与其编码 DNA 之间的联系,我们可以通过一种简单的称为“生物淘选”的体外筛选方法,快速筛选出给定靶分子(抗体、酶、细胞表面受体等)的亲和配体。最简单的淘选方法是(见图 1):将展示不同多肽的噬菌体文库与固定在平板或小珠上的靶分子孵育,先洗去未结合的噬菌体,而后洗脱特异性结合的噬菌体。扩增洗脱下的噬菌体。重复上述结合扩增过程,使与靶分子结合的多肽序列的噬菌体得到富集。经过 3-4轮筛选后,每个克隆通过 DNA 测序或 ELISA 鉴定。
NEB 提供 3 种随机肽库和供自制肽库所需的 M13KE克隆展示载体。这 3 种肽库包括 7 肽库(Ph.D.-7)、12 肽库(Ph.D.-12)和含有二硫键的环 7 肽库(Ph.D.-C7C)。Ph.D.-C7C 随机肽库所展示的多肽两侧各加了一个半胱氨酸。噬菌体组装时经过氧化,形成环化的多肽。所有肽库的容量超过 20 亿个克隆。上述 3 种肽库表达的随机肽均在噬菌体次要包膜蛋白 pIII 的 N 端,故每一个病毒粒子可以表达 5 个拷贝。
展示在噬菌体表面的随机肽库已被应用于多种领域,包括绘制抗原表位图谱(图 2)、研究蛋白质与蛋白质相互作用及酶抑制剂,并且还用于发现 GroEL、HIV、半导体表面、小分子荧光团和药物的肽配基。
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