Chidamide是合成的苯甲酰胺型 HDAC 抑制剂，抑制HDAC1，HDAC2，HDAC3 和 HDAC10 的 IC50 分别为95，160，67和78 nM。

靶点

体外研究

低浓度的Chidamide（CS055）能显著抑制每一个细胞系的细胞增殖。Chidamide治疗后，细胞在g0/g1阶段呈剂量依赖性停滞。Western blot分析表明，Chidamide处理后细胞周期蛋白e1和e2的表达下调，与细胞周期分析一致。由于细胞周期蛋白e1的变化比细胞周期蛋白e2更为显著，所以通过慢病毒转导，细胞周期蛋白e1在HL60和K562细胞中上调。当cyclin e1过度表达时，chidamide抑制对白血病增殖的影响会大大减弱。因此，在g0/g1阶段，细胞周期素e1水平很可能被Chidamide降低，从而导致细胞周期停滞。与载体处理的细胞相比，Chidamide对细胞增殖具有显著的浓度依赖性抑制作用（P<0.05）。在5μm时达到最大抑制效果。

体内研究

以剂量依赖的方式观察了Chidamide（CS055）对肿瘤生长的抑制作用，证明了Chidamide的抗肿瘤活性。对照组肿瘤20天后平均体积增长到14.51立方厘米，chidamide治疗的肿瘤分别增长到11.68、11.05和8.45立方厘米，分别对应于19.54%、23.83%和41.80%的生长抑制。用媒剂治疗的动物的平均肿瘤质量为9.4±2.7 g，用低剂量chidamide治疗的动物的平均肿瘤质量为8.4±2.4 g。在用中剂量的chidamide治疗的动物中，肿瘤质量为7.6±1.6g，而接受高剂量chidamide治疗的动物的肿瘤质量为5.4±1.5g（p<0.01）。此外，Chidamide治疗延长了携带HL60异种移植物的裸鼠的存活率。此外，肿瘤组织中脂质过氧化产物（MDA）的水平（作为ROS介导的损伤的一种推测性测量）随着Chidamide的治疗而升高，提示Chidamide诱导的ROS生成可能起到一定作用。

Belinostat

MB3885

CUDC-907

MB4754

Scriptaid

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.5614 mL

12.8070 mL

25.6141 mL

5 mM

0.5123 mL

2.5614 mL

5.1228 mL

10 mM

0.2561 mL

1.2807 mL

2.5614 mL

HDAC活性检测如比色HDAC活性检测试剂盒中所述。每个反应（100μl）都含有从白血病细胞和hdac底物中提取的核蛋白（50μg）。为了测试hdacis的效果，将Chidamide（CS055）和MS-275添加到混合物中，并在37°C下孵育1小时。用微板阅读器在405 nm下测量hdacis的活性。阳性对照品（仅核提取物和载体）设为100%，阴性对照品为含有10μm Trichostatin A（一种已知的强hdaci）的双蒸馏水，设为0%。

细胞实验

Chidamide（CS055）溶解于二甲基亚砜中储存，使用前用适当的培养基稀释。
用CCK-8法评价PATU8988细胞的增殖。将PATU8988细胞随机分为4组，分别在0、1.25、2.5、5μm）Chidamide浓度或不存在的情况下孵育48 h，然后在每孔中加入10μl CCK-8，孵育2 h，用450 nm的微板阅读器测量每孔的光密度。细胞存活率按以下公式计算：细胞存活率（%）=1-（odctrl-odsample）/odctrl×100%。

动物实验 

将Chidamide（CS055）悬浮于0.1％羧甲基纤维素钠中
小鼠
使用雄性BALB / c裸鼠（6周龄）。 将每只小鼠接种在右腋窝中，其中2×107个HL60细胞悬浮在0.2mL PBS中。 在0.5周后，将携带肿瘤达到200±100mm 3的小鼠随机分成4组（n = 8），并通过管饲法每天接受0.1％羧甲基纤维素钠作为载体和12.5,25或50mg / kg体重的Chidamide 20天。 每天测量肿瘤体积和体重。