966.21

化学式

C52H79N5O12

CAS号

221877-54-9

稳定性

3 years -20°C powder

100 mg/mL (103.49 mM)

Ethanol

100 mg/mL (103.49 mM)

Water

Insoluble

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.0350 mL

5.1749 mL

10.3497 mL

5 mM

0.2070 mL

1.0350 mL

2.0699 mL

10 mM

0.1035 mL

0.5175 mL

1.0350 mL

50 mM

0.0207 mL

0.1035 mL

0.2070 mL

Zotarolimus (ABT-578)是rapamycin的类似物,可以抑制FKBP-12结合的IC50为2.8nM。

特性

Zotarolimus在体内半衰期短，并且在大鼠体内表现出比雷帕霉素弱的全身性免疫抑制作用。

靶点

体外研究

Zotarolimus (ABT-578)是雷帕霉素的半合成类似物，由四唑环取代雷帕霉素42位上的天然羟基组制成。Zotarolimus能够高效抑制平滑肌细胞和内皮细胞的增殖，IC50值分别为2.9 nM和2.6 nM。Zotarolimus具有与雷帕霉素相似的结合免疫蛋白FKBP12的亲和力，也具有相当的抑制人和大鼠T细胞体外增殖的效力。Zotarolimus抑制Con A诱导的人T细胞和大鼠T细胞的增殖，IC50 分别为7.0 nM和1337 nM。

体内研究

在28天充分表征的冠状动脉再狭窄的猪模型中，Zotarolimus洗脱支架有效减少内膜增生。与金属裸支架相比，Zotarolimus似乎能够有效防止新生内膜增厚，使后期损失从1.03mm降低到0.62mm，并伴随47%的TVF减少(15.4%Driver支架到8.1%Endeavor支架)。Zotarolimus能够有效抑制佐剂DTH，EAE，和心脏移植排斥反应，ED50值分别为1.72，1.17，和3.71毫克/千克/天

对FKBP12的亲和力:
96孔微量滴定板首先用FKBP-12 CMP-KDO合成酶融合蛋白以10 微克/毫升，100微升/孔涂层2-3小时，随后加入50微升/孔缓冲液A(2% BSA 和0.2% Tween-20 D-PBS溶液) 进行30-60 分钟。然后将微量滴定板用缓冲液B(0.2% Tween 的D-PBS溶液，pH调节为7.4)清洗3次。50微升缓冲液A(最大)，20 μM FK506缓冲液A (背景)，或者各种浓度的zotarolimus (10 pM-1 μM)在缓冲液A中加入到各孔中，随后加入50微升含A-79397 (一个FK506类似物)碱性磷酸酶偶联物缓冲液A。微量滴定板在室温下培育2-2.5小时，随后用缓冲液B清洗3次。将大约100微升pNPP (p-硝基苯基-磷酸盐)的0.1 M氨基甲基丙醇加入到每孔中，平板在室温下大约培养90-120分钟。405 nM下的吸光度通过ELISA板读取。

细胞实验：

• Cell lines: 人冠状动脉细胞
• Concentrations: ~1 μM
• Incubation Time: 5天
• Method: 细胞增殖通过测量体外氚化胸腺嘧啶的整合测定。人冠状动脉细胞(hCa)接种在组织培养瓶中扩增，并在完全培养基(5000 hCaSMC; 10 000 hCaEC)中以所需浓度应用于96孔板。2天后，用不完全培养基取代完全培养基使细胞同步，并诱导G0状态。2天后，移除不完全培养基，用完全培养基 (血清/生长因子) 取代以诱导G0到G1转变。完全培养基中也包含所需浓度的药物，以确定其对细胞增殖的影响。在第7天，将3H-胸苷加入到细胞中，并监控DNA的合成，放射性整合过夜后收集细胞。培育72小时后，每孔加入25微升(1 μCi/孔) 3H-胸苷。细胞在37°C下培育16-18小时，以允许3H-胸苷整合到新合成的DNA中，将细胞采集到含有粘合玻璃纤维过滤器的96孔板中。将滤板在空气中干燥过夜，MicroScint-20 (25 微升)加入到每个过滤器孔中并计数。药物活性通过3H-胸苷整合到新合成的DNA中相对于细胞在完全培养基中的生长确定。

动物实验：

• Animal Models: 雄性Sprague-Dawley大鼠
• Formulation: 乙醇:丙二醇:聚氧乙烯蓖麻油: D5W 载体 (20: 30: 2: 48，体积)
• Dosages: 2.5毫克/千克
• Administration: 静脉注射或口服