SB1317 是一种有效的 CDK2，JAK2 和 FLT3 抑制剂，IC50 分别为 13，73 和 56 nM。

靶点

体外研究

SB1317具有一个高度新颖的激酶抑制谱，抑制63种激酶中的17种，其中11种是CDK/JAK/FLT家族成员。其他的，lck，fyn，fms，tyro3，erk5和p38δ，与炎症和增殖过程有关。在最高试验浓度25μm时，SB1317不抑制人CYP1A2、3A4、2C9和2C19亚型，但SB1317抑制CYP2D6，IC50=0.95μm，大约在最大耐受剂量下观察到的血浆Cmax。SB1317抑制HCT-116（IC50=0.079μm）和HL-60（IC50=0.059μm）中的细胞增殖浓度。SB1317是一种新型的小分子高效CDK/JAK2/FLT3抑制剂。SB1317在体外主要由cyp3a4和cy1a2代谢。除了cyp2d6（IC50=1μm），SB1317在体外不抑制任何主要的人cyp。SB1317在体外对人肝细胞无明显诱导作用。

体内研究

以75 mg/kg po q.d.3×/周的剂量治疗SB1317可显著抑制肿瘤生长，平均TGI为82%，而较低剂量50 mg/kg po 3×/周的治疗效果微乎其微。使用任何一种方案的SB1317治疗均能显著抑制肿瘤的生长，口服和IP给药方法的平均TGIS分别为42%和63%。在药代动力学研究中，SB1317显示，小鼠、大鼠和狗体内的中到高系统清除率（相对于肝血流量）、高分布量（>0.6 l/kg）、口服生物利用度分别为24%、4%和37%；小鼠体内的组织广泛分布。

PHA-793887

MB4022

SNS-032 (BMS-387032)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.6849 mL

13.4243 mL

26.8485 mL

5 mM

0.5370 mL

2.6849 mL

5.3697 mL

10 mM

0.2685 mL

1.3424 mL

2.6849 mL

使用重组酶（CDK2/细胞周期蛋白A、JAK2和FLT3）。使用pklight分析系统在384孔滴定板中进行所有分析。该分析平台是利用荧光素酶偶联反应检测反应中三磷酸腺苷的光度分析。从10μm开始，以3倍或4倍连续稀释制备的8种浓度对化合物进行测试。对于CDK2/cyclin A分析，反应混合物由以下成分组成：25μl分析缓冲液（50 mM HEPES，pH7.5，10 mM MgCl2，5 mM MnCl2，5 mM BGP，1 mM DTT，0.1 mM原钒酸钠），1.4μg/m l CDK2/cyclin A COMPLEX、0.5μm的研磨基板和0.5μm的ATP。将混合物在室温下培养2小时，然后加入13μl pklight ATP检测试剂，培养10分钟，在多标板阅读器上检测发光信号。分析软件Prism 5.0用于根据数据生成IC50值。

细胞实验

SB1317在DMSO中制备并储存，然后在使用前用适当的培养基稀释。
对于96孔板中的增殖测定，将20000个细胞接种在100μL培养基中，并在第二天用化合物（例如SB1317）（一式三份）以高达10μM的浓度处理48小时。 使用CellTiter-96 Aqueous One溶液细胞增殖测定监测细胞活力。 绘制剂量 – 反应曲线以使用XL-fit软件确定化合物的IC 50值。

动物实验 

将SB1317盐酸盐溶于0.5％甲基纤维素/0.1%吐温80（MC / Tween）中用于口服（po）给药或在10％二甲基乙酰胺（DMA）和10％Cremophor（DMA / CRE）中用于ip给药。每周以每千克体重10mL的进料体积制备给药溶液，并在4℃下储存。
小鼠和大鼠
雄性BALB / c小鼠（年龄约10-12周，体重17-22g），雄性Beagle犬（约6-7个月，体重10-14kg）和雄性Wistar大鼠（6-8周龄，在该研究中使用重量为239-249g）。小鼠，狗和大鼠的口服剂量分别为75,10和10mg / kg。通过管饲法将剂量作为悬浮液（0.5％甲基纤维素和0.1％吐温80）给予小鼠和大鼠，并作为明胶胶囊（12只Torpac）给予狗。口服给药后，在含有K3EDTA作为抗凝血剂的试管中，在不同时间点（0-24小时）收集连续血样（小鼠心脏穿刺，小鼠颈静脉和大鼠上腔静脉），离心，分离血浆，储存在-70°C直至分析。通过LC-MS / MS处理和分析血浆样品。使用WinNonlin通过非房室方法估计药代动力学参数。