LAMP法介绍,环介导等温扩增法,日本荣研

什么是环介导等温扩增法?

环介导等温扩增法

环介导等温扩增法是“Loop-Mediated Isothermal Amplification”的简称、是荣研化学独立研发的一种“简便、快速、准确、廉价”的基因扩增方法。 环介导等温扩增法的特征是针对目标DNA链上的六个区段设计四个不同的引物然后再利用链置换反应在一定温度下进行反应。反应只需要把基因模板、引物、链置换型DNA合成酶、基质等共同置于一定温度下(60~65℃)、经一个步骤即可完成。扩增效率极高,可在15分~1小时内实现109~1010倍的扩增。而且由于有着高度的特异性,只需根据扩增反应产物的有无即可对靶基因序列的存在与否作出判断。

特征

不需要使双链DNA先变性成单链。

扩增反应在等温下可持续进行。

扩增的效率极高。

针对六个区段使用四种不同的引物,可特异性扩增靶基因序列。

仅使用一种链置换型DNA聚合酶,成本低廉。

扩增产物是在同一条DNA链上互补序列周而复始形成大小不一的结构。

当模板是RNA时,仅需加入逆转录酶即可与DNA一样进行扩增。