NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析,SNAP-Cell 启动试剂盒,#E9100S

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

SNAP-Cell 启动试剂盒(停产,组分可单独购买)

#E9100S 1套

停产通知

产品于 2020 年 1 月 2 日停产,产品组分可单独购买

特性

 详细简便的标记步骤
 附有超强且特性明确的荧光基团
 包含对照质粒;能对表达蛋白进行精确的亚细胞定位
 无论检测蛋白位于细胞内还是细胞表面,都能提供精确定位

概述

为使研究者快速、简便地应用我们的蛋白质标记系统,我们的启动试剂盒提供了标记 SNAP-tag 或 CLIP-    tag 融合蛋白的所有必需组份,能在活细胞、固定细胞及体外将红色或绿色荧光基团共价连接到目标蛋白上。每种启动试剂盒包括一种编码所选 tag 的质粒和两种细胞通透性的或细胞非通透性的荧光标记物。试剂盒同时提供相应阳性对照质粒,其编码有明确亚细胞定位的标签蛋白(如:膜蛋白、核蛋白等)。试剂盒还会提供一个与目的标签相互作用的非荧光的阴性对照阻断剂。

荧光基团

每种荧光基团的亮度和稳定性都经过严格的验证。另外,每种荧光基团还要通过以下检测:细胞通透性(  SNAP-Cell 和 CLIP-Cell 产品)或特异性标记细胞表面蛋白的能力(SNAP-Surface,CLIP-Surface)。
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析
SNAP-Cell TMR-Star 和 CLIP-Cell TMR-Star 是光稳定的红色荧光底物,可用于分别标记活细胞内部、固定化细胞内部、细胞表面或体外的 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白。这些细胞通透性底物为四甲基罗丹明衍生物,可用标准罗丹明滤镜成像。当它们共价连接于 SNAP-tag 或 CLIP-tag 蛋白质后,能在波长 554   nm 处被激发,释放出波长为 580 nm的荧光。
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析
SNAP-Cell 505-Star 和 CLIP-Cell 505 是光稳定的绿色荧光底物,可用于分别标记活细胞内部、固定化细胞内部、细胞表面或体外的 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白。这些细胞通透性底物可用标准荧光滤镜成像。当它们共价连接于 SNAP-tag 或 CLIP-tag 蛋白质后,能在 504 nm 波长处被激发,释放出波长为 532 nm 的荧光。
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析
SNAP-Surface 549 是光稳定的荧光底物,可以用于标记溶液中或活细胞表面的 SNAP-tag 融合蛋白。该细胞非通透性底物适于使用标准 TAMRA 或 Cy3 滤镜成像。当它共价连接于 SNAP-tag 融合蛋白后,能在    560 nm 波长处被激发,释放出波长为 575 nm 的荧光。
SNAP-Surface 488 和 CLIP-Surface 488 是光稳定的荧光底物,可用于分别标记溶液中、活细胞表面或固定化细胞表面的 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白。这些细胞非通透性底物可用标准荧光滤镜成像。当它们共价连接于 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白后,能在 506 nm 波长处被激发,释放出波长为 526 nm 的荧光。
CLIP-Surface 547 是一种光稳定的红色荧光底物,可用于标记活细胞表面的 CLIP-tag 融合蛋白。该细胞非通透性底物适于使用标准 TAMRA 或 Cy3 滤镜成像。当它共价连接于 CLIP-tag 融合蛋白后,能在 554 nm 波长处被激发,释放出波长为 568 nm 的荧光。

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SNAP-Surface 启动试剂盒

NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析,SNAP-Surface 启动试剂盒,#E9120S

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

SNAP-Surface 启动试剂盒

#E9120S 1套

特性

 详细简便的标记步骤
 附有超强且特性明确的荧光基团
 包含对照质粒;能对表达蛋白进行精确的亚细胞定位
 无论检测蛋白位于细胞内还是细胞表面,都能提供精确定位

概述

为使研究者快速、简便地应用我们的蛋白质标记系统,我们的启动试剂盒提供了标记 SNAP-tag 或 CLIP-   tag 融合蛋白的所有必需组份,能在活细胞、固定细胞及体外将红色或绿色荧光基团共价连接到目标蛋白上。每种启动试剂盒包括一种编码所选 tag 的质粒和两种细胞通透性的或细胞非通透性的荧光标记物。试剂盒同时提供相应阳性对照质粒,其编码有明确亚细胞定位的标签蛋白(如:膜蛋白、核蛋白等)。试剂盒还会提供一个与目的标签相互作用的非荧光的阴性对照阻断剂。

荧光基团

每种荧光基团的亮度和稳定性都经过严格的验证。另外,每种荧光基团还要通过以下检测:细胞通透性( SNAP-Cell 和 CLIP-Cell 产品)或特异性标记细胞表面蛋白的能力(SNAP-Surface,CLIP-Surface)。

NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析

SNAP-Cell TMR-Star 和 CLIP-Cell TMR-Star 是光稳定的红色荧光底物,可用于分别标记活细胞内部、固定化细胞内部、细胞表面或体外的 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白。这些细胞通透性底物为四甲基罗丹明衍生物,可用标准罗丹明滤镜成像。当它们共价连接于 SNAP-tag 或 CLIP-tag 蛋白质后,能在波长 554   nm 处被激发,释放出波长为 580 nm 的荧光。
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析
SNAP-Cell 505-Star 和 CLIP-Cell 505 是光稳定的绿色荧光底物,可用于分别标记活细胞内部、固定化细胞内部、细胞表面或体外的 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白。这些细胞通透性底物可用标准荧光滤镜成像。当它们共价连接于 SNAP-tag 或 CLIP-tag 蛋白质后,能在 504 nm 波长处被激发,释放出波为 532    nm 的荧光。
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析
SNAP-Surface 549 是光稳定的荧光底物,可以用于标记溶液中或活细胞表面的 SNAP-tag 融合蛋白。该细胞非通透性底物适于使用标准 TAMRA 或 Cy3 滤镜成像。当它们共价连接于 SNAP-tag 融合蛋白后,能在 560 nm 波长处被激发,释放出波长为 575 nm 的荧光。
SNAP-Surface 488 和 CLIP-Surface 488 是光稳定的荧光底物,可用于分别标记溶液中、活细胞表面或固定化细胞表面的 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白。这些细胞非通透性底物可用标准荧光滤镜成像。当它们共价连接于 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白后,能在 506 nm 波长处被激发,释放出波长为 526 nm 的荧光。
CLIP-Surface 547 是光稳定的红色荧光底物,可分别用于标记活细胞表面的 CLIP-tag 融合蛋白。这些细胞非通透性底物适于使用标准 TAMRA 或 Cy3 滤镜成像。当它们分别共价连接于 CLIP-tag 融合蛋白后,能在 554 nm 波长处被激发,释放出波长为 568 nm 的荧光。

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NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析,pSNAP-tag(T7)-2 载体,#N9181S

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

pSNAP-tag(T7)-2 载体

#N9181S 20 µg

特性

 提供可在哺乳动物和细菌中表达的载体
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析
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概述

NEB 提供几种表达载体,该载体能表达携带有 SNAP-tag 和 CLIP-tag 的融合蛋白,适用于在哺乳动物及细菌中标记,相应的启动试剂盒也包含有相应的载体。哺乳动物 SNAPf 和 CLIPf 载体表达 SNAP- 和 CLIP-tags 的速度较之前的载体更快。表达载体中,tag 的上、下游具有改造后的多克隆位点,使得 tag 可以表达在目的蛋白的任何一端,该表达过程受 CMV 启动子调控。SNAPf-tag 和 CLIPf-tag 表达载体中携带新霉素抗性基(NeoR),可用于筛选稳定转染子。载体上还带有一个 IRES 元件,有助于融合蛋白和 NeoR 的高效表达。为在哺乳动物细胞中高效表达,Tag 基因中的密码子已经过优化。NEB 还提供对照质粒,这些质粒编码的融合蛋白分别定位于细胞(H2B)、线粒体(Cox8A)和细胞表面(ADRβ2, NK1R),启动试剂盒中包含相应的对照质粒(见 290 页)。
细菌表达载体 pSNAP-tag(T7)-2 包含位于 SNAP-tag 上、下游的克隆位点,受 T7启动子调控。为在E. coli中高效表达,SNAP-tag 基因中的密码子已经过优化。

来源

通过标准的质粒纯化程序,分离自 E. coli 菌株。质粒无内毒素污染,可用于高效转染。

浓度

500 μg/ml。

限制图谱

pSNAPf 载体的详细描述和限制性酶切图谱请见 389 页。查看所有表达载体和对照质粒的序列和图谱文件,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。
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NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析,pSNAPf 载体,#N9183S

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

pSNAPf 载体

#N9183S 20 µg

特性

 提供可在哺乳动物和细菌中表达的载体
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析

概述

NEB 提供几种表达载体,该载体能表达携带有 SNAP-tag 和 CLIP-tag 的融合蛋白,适用于在哺乳动物及细菌中标记,相应的启动试剂盒也包含有相应的载体。哺乳动物 SNAPf 和 CLIPf 载体表达 SNAP- 和 CLIP-tags 的速度较之前的载体更快。表达载体中,tag 的上、下游具有改造后的多克隆位点,使得 tag 可以表达在目的蛋白的任何一端,该表达过程受 CMV 启动子调控。SNAPf-tag 和 CLIPf-tag 表达载体中携带新霉素抗性基(NeoR),可用于筛选稳定转染子。载体上还带有一个 IRES 元件,有助于融合蛋白和 NeoR 的高效表达。为在哺乳动物细胞中高效表达,Tag 基因中的密码子已经过优化。NEB 还提供对照质粒,这些质粒编码的融合蛋白分别定位于细胞(H2B)、线粒体(Cox8A)和细胞表面(ADRβ2, NK1R),启动试剂盒中包含相应的对照质粒(见 290 页)。
细菌表达载体 pSNAP-tag(T7)-2 包含位于 SNAP-tag 上、下游的克隆位点,受 T7启动子调控。为在E. coli 中高效表达,SNAP-tag 基因中的密码子已经过优化。

来源

通过标准的质粒纯化程序,分离自 E. coli 菌株。质粒无内毒素污染,可用于高效转染。

浓度

500 μg/ml。

限制图谱

pSNAPf 载体的详细描述和限制性酶切图谱请见 389 页。查看所有表达载体和对照质粒的序列和图谱文件,请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。
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NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析,pCLIPf 载体,#N9215S

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

pCLIPf 载体

#N9215S 20 µg

特性

 提供可在哺乳动物和细菌中表达的载体
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析

概述

NEB 提供几种表达载体,该载体能表达携带有 SNAP-tag 和 CLIP-tag 的融合蛋白,适用于在哺乳动物及细菌中标记,相应的启动试剂盒也包含有相应的载体。哺乳动物 SNAPf 和 CLIPf 载体表达 SNAP- 和 CLIP-tags 的速度较之前的载体更快。表达载体中,tag 的上、下游具有改造后的多克隆位点,使得 tag 可以表达在目的蛋白的任何一端,该表达过程受 CMV 启动子调控。SNAPf-tag 和 CLIPf-tag 表达载体中携带新霉素抗性基(NeoR),可用于筛选稳定转染子。载体上还带有一个 IRES 元件,有助于融合蛋白和 NeoR 的高效表达。为在哺乳动物细胞中高效表达,Tag 基因中的密码子已经过优化。NEB 还提供对照质粒,这些质粒编码的融合蛋白分别定位于细胞(H2B)、线粒体(Cox8A)和细胞表面(ADRβ2, NK1R),启动试剂盒中包含相应的对照质粒(见 290 页)。
细菌表达载体 pSNAP-tag(T7)-2 包含位于SNAP-tag 上、下游的克隆位点,受 T7 启动子调控。为在E. coli中高效表达,SNAP-tag 基因中的密码子已经过优化。

来源

通过标准的质粒纯化程序,分离自 E. coli 菌株。质粒无内毒素污染,可用于高效转染。

浓度

500 μg/ml。

限制图谱

pSNAPf 载体的详细描述和限制性酶切图谱请见 389 页。
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NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析,抗 SNAP-tag 的多克隆抗体,#P9310S

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

抗 SNAP-tag 的多克隆抗体

#P9310S 100 μl

概述

Anti-SNAP-tag 抗体 (多克隆) 可用于 SNAP-tag和 CLIP-tag 蛋白的 Western blot 实验。多克隆抗体来自用纯化的重组 SNAP-tag 蛋白免疫的兔子,并用 Protein A 亲和层析介质进行亲和纯化。

灵敏度

在 Western blotting 实验中,可检测到泳道中 5 ng 的 SNAP-tag。

推荐稀释度

1:1000。

NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析,纯化的 SNAP-tag 蛋白,#P9312S

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

纯化的 SNAP-tag 蛋白

#P9312S 50 µg

概述

NEB 提供纯化蛋白,作为体外标记 SNAP-tag 荧光底物的阳性对照。

浓度

50 µM

分子量

19,694

NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析,SNAP-Cell 647-SiR,#S9102S

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

SNAP-Cell 647-SiR

#S9102S 30 nmol

特性

 荧光标记 SNAP-、CLIP- 或 ACP-tag 融合蛋白,用于细胞成像
 标记物的荧光光谱波长范围从紫外(360 nm)至远红外(647+ nm)
 有细胞通透性和非通透性两种标记物
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析

概述

NEB 提供大量的用于标记 SNAP-、CLIP- 和 ACP-tag 融合蛋白的荧光底物供研究者选择。SNAP-tag 底物是由染料及通过苄基键耦联到染料上的鸟嘌呤或氯嘧啶构成;CLIP-tag 底物是由染料及通过苄基耦联至染料上的胞嘧啶构成。这些底物无需酶促反应,即可自我标记相应的 tag 标签。细胞通透性底物(SNAP- 和 CLIP-Cell)不仅能标记细胞内部也能标记细胞表面,而细胞非通透性底物(SNAP- 和 CLIP-Surface)仅能特异性的标记在细胞表面表达的融合蛋白。
ACP-tag 的标记基团与辅酶 A(CoA)的磷酸泛酰巯基乙胺耦联,在 ACP 或 SFP 合成酶作用下,完成标记反应。标记反应仅特异地发生在细胞表面表达的融合蛋白上。使用同种底物标记 ACP-tags;用于标记的合成酶标记决定反应特异性(见 292 页)。

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NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析,SNAP-Cell 505-Star,#S9103S

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

SNAP-Cell 505-Star

#S9103S 50 nmol

特性

  荧光标记 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白,用于

细胞成像
 标记物的荧光光谱波长范围从紫外(430 nm)
至远红外(647+ nm)
 有细胞通透性和非通透性两种标记物

概述

  NEB 提供大量的用于标记 SNAP-tag 和 CLIP-tag 融合蛋白的荧光底物供研究者选择。SNAP-tag 底物是由荧光染料及通过苄基键耦联到染料上的鸟嘌呤或氯嘧啶构成;CLIP-tag 底物是由荧光染料及通过苄基耦联至染料上的胞嘧啶构成。这些底物无需酶促反应,即可自我标记相应的 tag 标签。细胞通透性底物(SNAP-Cell 和 CLIP-Cell)不仅能标记细胞内部也能标记细胞表面,而细胞非通透性底物(SNAP-Surface 和 CLIP-Surface)仅能特异性的标记在细胞表面表达的融合蛋白。

NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析

NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析,SNAP-Cell Oregon Green®,#S9104S

产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

SNAP-Cell Oregon Green®

#S9104S 50 nmol

特性

 荧光标记 SNAP-、CLIP- 或 ACP-tag 融合蛋白,用于细胞成像
 标记物的荧光光谱波长范围从紫外(360 nm)至远红外(647+ nm)
 有细胞通透性和非通透性两种标记物
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析

概述

NEB 提供大量的用于标记 SNAP-、CLIP- 和 ACP-tag 融合蛋白的荧光底物供研究者选择。SNAP-tag 底物是由染料及通过苄基键耦联到染料上的鸟嘌呤或氯嘧啶构成;CLIP-tag 底物是由染料及通过苄基耦联至染料上的胞嘧啶构成。这些底物无需酶促反应,即可自我标记相应的 tag 标签。细胞通透性底物(SNAP- 和 CLIP-Cell)不仅能标记细胞内部也能标记细胞表面,而细胞非通透性底物(SNAP- 和 CLIP-Surface)仅能特异性的标记在细胞表面表达的融合蛋白。
ACP-tag 的标记基团与辅酶 A(CoA)的磷酸泛酰巯基乙胺耦联,在 ACP 或 SFP 合成酶作用下,完成标记反应。标记反应仅特异地发生在细胞表面表达的融合蛋白上。使用同种底物标记 ACP-tags;用于标记的合成酶标记决定反应特异性(见 292 页)。

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