属性
生物来源
bacterial
质量水平
100
无菌性
non-sterile
形式
lyophilized
specific activity
≥0.8?units/mg protein (37 °C, casein as substrate, pH 7.5)
包装
pkg of 5 × 1?g
manufacturer/tradename
Roche
最佳pH
6.0-8.5
application(s)
sample preparation
运输
wet ice
说明
一般描述
分散酶是一种中性、快速反应、温和的蛋白酶,能将表皮从真皮中完整分离。它还能将培养的上皮细胞从基质中完整分离出来。其可分裂基底膜区,使上皮细胞保持完整。
特异性
分散酶是一种非特异性的金属蛋白酶。
应用
分散酶?用于从多种不同的组织和器官制备细胞。该酶已经证实是一种快速、有效但温和破坏组织胞外基质的制剂,可释放用于细胞培养的单细胞(原代细胞培养)或收集培养细胞以转至新底物中(继代培养)。此外,它还可用来防止细胞悬浮培养过程中形成不必要的团块。
特点和优势
快速有效又温和的试剂,在最小的细胞损伤下释放细胞
维持细胞膜完整性
非哺乳动物来源-无支原体和动物病毒污染
对温度、pH 值和血清成分干扰的影响非常稳定
易被螯合剂或稀释液灭活
提供更高的活性和便利性
单位定义
一单位是指在pH 7.5、+37 °C反应条件下,在1分钟内释放出对应1 μmol (181 μg)酪氨酸的Folin-阳性的氨基酸和肽类所需的酶量。
Roche分散酶?II单位与日本文献中引用的分散酶单位(其中分散酶?浓度为1,000到2,000单位/ml的情况不常见)的实际比较结果表明,Roche的1单位分散酶大致相当于日本的600单位。
Roche Applied Science的1单位?相当于181蛋白酶单位(PU),其中PU为在pH 7.5和+37 °C条件下,在1分钟内释放相当于1 μg酪氨酸的氨基酸所需的酶量。
制备说明
激活剂:最佳Ca2+ 浓度为2mM。酶制剂含有维持最佳活性所需的足量Ca2+。
抑制剂:EDTA、EGTA、Hg2+、其他重金属。分散酶不受血清抑制。
工作浓度:0.6至2.4 U/ml
工作溶液:储备溶液和工作溶液制备:
制备10mg/ml的储备溶液,将分散酶?II冻干粉溶于HEPES-缓冲盐溶液中(50 mM HEPES/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl)。制备工作溶液,将上述储备溶液用分离细胞培养基稀释至终浓度为0.6到2.4U/ml。请注意,建议浓度不要高于2.4U/ml。为实现最佳结果,用0.22μm滤膜过滤工作溶液。
储存条件(工作溶液):-15 至 -25 °C
复溶的储备溶液在2至8℃下可稳定保存2周。如需保存2个月以上,储备溶液需分装冻存。避免反复冻融! 采用PBS稀释的工作溶液在2至8℃下可稳定保存3天。
储存及稳定性
2至8 °C储存。(干燥储存!)
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
D、销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或者科研等非医疗目的。