Lenvatinib (E7080)是一种多靶点抑制剂，无细胞试验中，作用于VEGFR2(KDR)/VEGFR3(Flt-4)最有效，IC50为4 nM/5.2，对VEGFR1/Flt-1作用效果稍弱，作用于VEGFR2/3比作用于FGFR1， PDGFRα/β选择性高10倍左右。

特性

E7080是口服有效的多靶点激酶抑制剂。

靶点

体外研究

E7080有效抑制血管生成，也显著抑制VEGF/KDR和SCF/KIT信号通路。根据体外受体酪氨酸和丝/苏氨酸激酶实验, E7080抑制Flt-1, KDR, 和Flt-4 时，IC50分别为22, 4.0 和5.2 nM。 除了这些激酶, E7080也抑制FGFR1和PDGFR 酪氨酸激酶，作用于FGFR1, PDGFRα 和PDGFRβ时，IC50分别为46, 51和 100 nM。E7080 分别作用于由VEGF和VEGF-C刺激的HUVECs，有效抑制VEGFR2和VEGFR3磷酸化，IC50分别为0.83 nM和0.36 nM。最新研究显示用 1 μM 和10 μM E7080 处理，通过抑制FGFR和PDGFR信号通路，而明显抑制细胞迁移和入侵。

体内研究

E7080按30和100 mg/kg剂量口服给药处理 H146 移植瘤模型，抑制H146肿瘤生长，这种作用存在剂量依赖性，按100 mg/kg剂量时导致肿瘤衰退。而且, E7080按 100 mg/kg剂量处理，比VEGF抗体和Imatinib处理，更加降低微脉管密度。

利尼伐尼；ABT869

MB3992

瓦他拉尼(PTK787 ) 2HCl

MB2944

瓦特拉尼碱

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.3427 mL

11.7137 mL

23.4274 mL

5 mM

0.4685 mL

2.3427 mL

4.6855 mL

10 mM

0.2343 mL

1.1714 mL

2.3427 mL

50 mM

0.0469 mL

0.2343 mL

0.4685 mL

体外激酶试验 :
通过HTRF(KDR, VEGFR1, FGFR1, c-Met, EGFR)和ELISA(PDGFRβ), 使用重组受体激酶域进行酪氨酸激酶实验。实验中, 4 μL 连续稀释的E7080与10 μL 酶，16 μL聚(GT)溶液(250 ng) 和10 μL ATP 溶液 (1 μmol/L ATP) (DMSO 终浓度为0.1%)在96孔板上混合。空白对照孔中不加酶，也不加样品。每孔加入ATP溶液开始进行激酶反应。30oC下反应30分钟后，通过在每孔反应混合物中通过加入10 μL 0.5 mol/L EDTA 终止反应。在反应混合物中针对每种激酶实验加入足够的稀释buffer。HTRF实验中, 50 μL反应混合物转移到 96孔1/2面积黑暗 EIA/RIA 板上,在反应混合物中加入HTRF溶液(50 μL/孔) ，然后通过荧光测定使用时间分辨荧光检测仪而测定激酶活性。ELISA实验中, 50 μL 反应混合物在抗生素蛋白包被的96孔板上室温下温育30分钟。用冲洗buffer冲洗后, 加入PY20-HRP 溶液 (70 μL/孔)，然后反应混合物在室温下温育30分钟。用冲洗buffer冲洗后, 每孔加入100 μL TMB 试剂。10-30分钟后, 每孔加入100 μL 1 mol/L H3PO4。使用酶标仪在450 nm测定吸光度而测定酶活性。

细胞实验

• Cell lines: HUVECs
• Concentrations: 0到10 μM
• Incubation Time: 72小时
• Method: HUVECs(每孔1,000个细胞，在含2%FBS的无血清培养基中)，L6大鼠骨骼肌成肌细胞(每孔5,000个细胞，在无血清DMEM培养基中)分布在96孔板上，温育过夜。 每孔加入E7080，含2% FBS的VEGF(20 ng/mL)或FGF-2(20 ng/mL)，和PDGFβ(40 ng/mL)。细胞温育3天，然后使用WST-1试剂测定细胞存活率。增殖实验中，重复样本，进行三个独立实验。

动物实验

• Animal Models: 体侧皮下注射H146肿瘤细胞的雌性BALB/c裸鼠
• Formulation: E7080溶于0.5%甲基纤维素
• Dosages: ≤100 mg/kg
• Administration: 口服处理