Anacetrapib (MK-0859)是一种有效的，选择性，可逆的rhCETP和突变CETP(C13S)抑制剂，IC50分别为7.9 nM和11.8 nM，提高HDL-C，降低LDL-C，不提高醛固酮和血压。

靶点

体外研究

Anacetrapib选择性有效抑制重组人类CETP和C13S突变型CETP，IC50分别为7.9和11.8 nM。Anacetrapib和抑制素一起服用时，不仅提高HDL-胆固醇水平,也进一步降低LDL-胆固醇水平。Anacetrapib明显降低CE从HDL3转变为HDL2，这种作用存在剂量依赖性。Anacetrapib不影响[14C]-dalcetrapibthiol与人类重组CETP的结合数。

体内研究

每天,Anacetrapib按60mg/kg剂量处理异常仓鼠模型，持续处理2周，与对照组相比，CETP活性下降94%，HDL-胆固醇上升47%，非HDL胆固醇浓度不受影响。此外,Anacetrapib 促进巨噬细胞胆固醇逆向转运，导致排泄物胆固醇含量上升30%。与对照组相比，Anacetrapib处理的仓鼠HDL显示SR-B1和ABCG1调节的流出物增多。按10 mg/kg剂量口服处理[14C]Anacetrapib，48小时后，鼠和猴分别恢复∼80和90%放射性。两种动物的排泄物中放射性基本没有变化。

Evacetrapib (LY2484595)

CL-11135

Torcetrapib

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.5686 mL

7.8430 mL

15.6860 mL

5 mM

0.3137 mL

1.5686 mL

3.1372 mL

10 mM

0.1569 mL

0.7843 mL

1.5686 mL

50 mM

0.0314 mL

0.1569 mL

0.3137 mL

• 使用scintillation proximity检测试剂盒测量Dalcetrapib，Torcetrapib和Anacetrapib降低rhCETP和C13S CETP从HDL向LDL的CE转移的抑制效力（IC50）。 简而言之，将[3H] CE标记的HDL供体颗粒在纯化的CETP蛋白（终浓度0.5μg/ mL）和生物素化的LDL受体颗粒的存在下于37℃温育3小时。 随后，添加含有液体闪烁混合物的链霉抗生物素蛋白偶联的聚乙烯基甲苯珠粒选择性地结合生物素化的LDL，并且通过β计数测量转移至LDL的[3H] CE分子的量。

细胞实验

• 在处理之前，将细胞接种在96孔板中过夜，用不同浓度的CETP抑制剂（例如Anacetrapib）处理24小时。 使用CellTiter-Glo发光细胞活力测定试剂盒测量细胞活力。 在每个实验条件下评估四个孔。

动物实验

• 小鼠
• 在受控温度（72°F）和照明（12小时光照/黑暗循环）下饲养8周龄雄性C57BL / 6J小鼠（4只动物/笼）。动物可以自由饮用高压灭菌的水和食物。在第一次体内研究中，在7天的适应期后，给小鼠喂食含有35％卡路里的脂肪和1.25％胆固醇的高脂肪高胆固醇饮食（HFHC），持续两周。然后将小鼠分成两组（每组n = 8），并通过口服强饲法给予50mg / kg的Anacetrapib日剂量。对照组接受载体（0.5％甲基纤维素）。药物治疗持续7天。在第二次体内研究中，喂食正常饲料的小鼠用Anacetrapib（50mg / kg，n = 8）或媒介物（n = 8）处理10天。在药物治疗之前和之后禁食4小时后收集血清样品。在最后一次给药后，处死所有动物以收集血清和肝组织。立即取出肝脏，切成小块，并储存在-80°C，用于RNA和蛋白质分离以及胆固醇测量。
• 大鼠
• 在研究之前，将体重为280至330g的成年雄性Sprague-Dawley大鼠禁食过夜。在给药后4小时允许动物接触食物，但随意提供水。对于静脉内施用，四只大鼠通过先前植入股静脉的导管推注注射Anacetrapib剂量（剂量体积2.5mL / kg），然后用300μL盐水冲洗。 Anacetrapib的静脉内剂量配制在聚乙二醇300-水（7：3，v / v）中，浓度为0.2mg / mL。对于口服给药，四只大鼠通过口服强饲法接受剂量（给药体积2mL / kg）。这些5,50,100和500mg / kg的口服剂量分别以2.5,25,50和250mg / mL的浓度配制在Imwitor 742-Tween 80（1：1，w / w）中。在以下时间点将血液样品（0.3mL）收集到含EDTA的管中：给药前和0.083（仅静脉内），给药后0.25,0.5,1,2,4,6,8,24和48小时。将血液样品储存在冰上，并通过离心制备血浆。将血浆转移至96孔板中并在-70℃下储存直至分析。