PQ 401抑制IGF-1R区域自磷酸化，IC50为低于1 μM。

靶点

IGF-1R  <1 μM

体外研究

PQ 401是IGF-1R 抑制剂，浓度<100 nM时，抑制IGF-IR激酶域的自磷酸化，IC50 < 1μM. PQ 401显著降低MCF-7细胞增殖，IC50为8 μM。PQ 401也抑制MCNeuA细胞生长，IC50为15 μM。PQ 401作用于MCF-7 细胞，抑制IGF-I调节的抗凋亡途径。PQ 401作用于MCF-7细胞，增强caspase调节的凋亡活性。

体内研究

PQ 401(50 mg/Kg,100 mg/Kg)显著抑制MCNeuA肿瘤生长，这种作用具有剂量依赖性。

BMS-754807

MB3908

GSK1838705A

MB3907

NVP-ADW742

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.9258 mL

14.6289 mL

29.2577 mL

5 mM

0.5852 mL

2.9258 mL

5.8515 mL

10 mM

0.2926 mL

1.4629 mL

2.9258 mL

50 mM

0.0585 mL

0.2926 mL

0.5852 mL

IGF-IR肽自磷酸化:
1μg组成型激活的IGF-IR激酶结构域肽与溶于2％DMSO的+/−不同浓度PQ401在40 mM Tris (pH 7.4), 80μM EGTA, 0.25% 2-巯基乙醇, 80μM Na3VO4, 10 mM MgCl2, 和2 mM MnCl2中温育20分钟。 然后加入终浓度为20μM的ATP。激酶结构域肽的自磷酸化在22°C下进行20分钟。加入SDS-还原 Buffer 终止反应，然后样品在SDS-PAGE上跑胶。转移到硝酸纤维素膜上后，使用抗磷酸酪氨酸抗体（PY20）进行Western blotting而测定肽自磷酸化。

细胞实验

• Cell lines: MCF-7, MCNeuA
• Concentrations: ~50 μM
• Incubation Time: 3 天
• Method: 使用CyQuant细胞增殖检测试剂盒测定Diaryl urea抑制乳腺癌细胞生长的效果。MCF-7或MCNeuA 细胞按每孔5×103个细胞接种于96孔板中，孔中为补充10% FCS的无酚红DMEM 培养基。每天制备一个实验板，用于收集。细胞粘附过夜，使用不同浓度Diaryl urea处理，或DMSO处理作为空白对照。 在实验第0，1，2，和3天，通过 反相微孔板到纸巾上收集微孔板培养物，使用温和印迹去除生长培养基，而不破坏贴壁细胞。每组实验板储存在−80°C下，直到实验末期 (第3天)，所有实验板解冻，一起检测。解冻后，每孔加入 200 μL CyQuant GR 溶液，实验板在黑暗中温育2到5分钟。使用SpectraMax Gemini XS荧光酶标仪在480-nm(激发)和520-nm(发射)处测量荧光值。计算增殖指数，作为实验第0天，核苷酸含量与对照细胞的百分比。

动物实验

• Animal Models: 注射MCNeuA细胞的 FVB/N-TgN(MMTVneu)202 小鼠
• Formulation: 8% 聚山梨酯80和乙醇
• Dosages: 50 或 100 mg/kg
• Administration: 腹腔注射