MK-2461是一种有效的，多靶点抑制剂，作用于c-Met(WT/mutants)，IC50为0.4-2.5 nM，对Ron，和Flt1作用效果稍弱；作用于c-Met比作用于FGFR1， FGFR2， FGFR3， PDGFRβ， KDR， Flt3， Flt4， TrkA和TrkB选择性高8到30倍。

特性

区别于其他已知的ATP竞争性酪氨酸激酶抑制剂，MK-2461优先结合激活的c – Met。而其它抑制物多不具有结合偏好或优先于结合未激活激酶。

靶点

体外研究

MK-2461能有效抑制FGFR1, FGFR2, FGFR3, KDR, TrkA, TrkB和Flt4，IC50分别为65 nM, 39 nM, 50 nM, 44 nM, 46 nM, 61 nM,和 78 nM。相比于野生型c-Met,，MK-2461更有效地抑制致原癌基因c-Met突变体 N1100Y, Y1230C, Y1230H, Y1235D,和M1250Tn1100y， IC 50分别为1.5 nM, 1.5 nM, 1.0 nM, 0.5 nM, 和0.4 nM。MK-2461与磷酸化c – met结合更强。MK-2461有效抑制ATP诱导的c-Met自身磷酸化产生在羧基端对接域，而不是激活环。与此相反，MK-2461在Kato III细胞和h1703细胞中抑制FGFR2 (Y653/Y654)和 PDGFR-α (Y849)的激活环磷酸活化，IC 50均 < 0.3μM。MK-2461在4MBr-5细胞中抑制肝细胞生长因子诱导的丝裂原，IC 50为204nM，和在HPAF II 细胞中肝细胞生长因子诱导的迁移，IC 50为404 nM，以及肝细胞生长因子诱导的MDCK细胞分支管型的形成。此外，MK-2461有效抑制由还Tpr-Met或Tpr-Met（y362c）突变的32D细胞中IL-3非依赖性增殖，IC 50 为~ 100nM。MK-2461明显抑制广谱肿瘤细胞系增殖，特别是针对高表达MET和FGFR2的癌细胞。

体内研究

MK-2461治疗显着抑制在GTL-16 肿瘤中c-Met（y1349）磷酸化，IC 50 ~ 1μM。口服MK-2461剂量为10mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg，每日两次，或200mg/kg，每日一次。口服处理可有效抑制GTL-16移植小鼠模型中肿瘤生长，抑制率分别为62%，77%，75%，和90%。同样，MK-2461处理含c-Met单核苷酸突变T3936C和T3997C的NI H3T 3肿瘤细胞，剂量为134 mg/kg，每天两次，抑制率分别为78%和62%。

Golvatinib (E7050)

MB5669

INCB28060

MB5240

JNJ38877605

MB3950

MK-2461

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.0180 mL

10.0898 mL

20.1796 mL

5 mM

0.4036 mL

2.0180 mL

4.0359 mL

10 mM

0.2018 mL

1.0090 mL

2.0180 mL

50 mM

0.0404 mL

0.2018 mL

0.4036 mL

时间分辨荧光共振能量转移法 :
使用时间分辨荧光共振能量转移法检测N生物素标记多肽(EQEDEPEGDYFEWLE-CONH2)催化c-Met 磷酸化。检测MK-2461 对Ron, Mer, Flt1, Flt3, Flt4, KDR, PDGFRβ, FGFR1, FGFR2, FGFR3, TrkA, 和TrkB的IC 50值。

细胞实验

• Cell lines: SW480, HT29, SW620, Colo 205, HCT116, HCT15, Colo 201, SCC-9, H1993, H1048, GTL-16, SNU15, 等等。
• Concentrations: 溶解于DMSO,终浓度为 ~100 μM
• Incubation Time: 72小时
• Method: 细胞用不同浓度的MK-2461处理 72小时。使用ViaLight PLUS 试剂盒检测肿瘤细胞活性。

动物实验

• Animal Models: GTL-16细胞或c – Met突变转化 NI H3T 3细胞移植于雌性CD-1 nu/nu 小鼠。
• Formulation: 溶解于DMSO,盐溶液稀释
• Dosages: ~134 mg/kg
• Administration: 口服一日两次