Ralimetinib (LY2228820) 是一种新型有效的p38 MAPK抑制剂，无细胞试验中IC50为7 nM，不改变p38 MAPK的活化。

特性

LY2228820是新型有效的p38有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路抑制剂。

靶点

体外研究

LY2228820作用于RAW 264.7细胞，抑制p38α,和磷酸MAPKAPK-2(pMK2)水平,IC50分别为7 nM 和 34.3 nM。而且, LY2228820作用于小鼠腹腔巨噬细胞，抑制脂多糖 (LPS)-诱导的TNFα形成, IC50为5.2 nM。200 nM-800 nM LY2228820作用于多发性骨髓瘤(MM)细胞, 包括INA6, RPMI-8226, U266, 和RPMI-Dox40,通过抑制HSP27磷酸化而显著抑制p38MAPK信号, HSP27是p38MAPK下游靶点,不影响 HSP27表达水平。200 nM-400 nM LY2228820增强Bortezomib诱导的细胞毒性和凋亡, 但是LY2228820 单独处理不会抑制MM.1S细胞生长。200 nM-800 nM LY2228820作用于长期骨髓基质干细胞(LT-BMSCs)，骨髓单个核细胞(BMMNCs)，外周血（PB）CD138+，CD138-或外周血（PB）CD14+细胞，也抑制IL-6和MIP-1α分泌。400 nM-800 nM LY2228820也抑制CD14+ 细胞形成破骨细胞。

体内研究

LY2228820 作用于LPS诱导的小鼠，有效抑制TNFα 形成，半数有效剂量最小阈值 (TMED 50)小于1 mg/kg。LY2228820 作用于患胶原性关节炎(CIA)大鼠模型,有效作用于足肿胀, 骨质糜烂, 和软骨破坏, 半数有效剂量最小阈值(TMED50)为 1.5 mg/kg。

SB202190 (FHPI)

MB5062

SB203580

MB4047

TAK-715

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.6320 mL

8.1601 mL

16.3201 mL

5 mM

0.3264 mL

1.6320 mL

3.2640 mL

10 mM

0.1632 mL

0.8160 mL

1.6320 mL

50 mM

0.0326 mL

0.1632 mL

0.3264 mL

抑制p38α实验:
使用重组人p38α 在标准过滤器中使用ATP[γ-33P] 和EGFR 21肽底物测定抑制p38α的效果。在LY2228820存在时，使用LPS刺激，在小鼠腹腔巨噬细胞测定抑制TNFα效果。在使用LY2228820处理，然后用Anisomycin刺激的RAW 264.7细胞中测定p38α活性。使用磷酸MAPKAPK-2(pMK2)(Thr 334)抗体测定p38α活性水平。

细胞实验

• Cell lines: MM细胞,包括 INA6, RPMI-8226, U266,和RPMI-Dox40
• Concentrations: 200 nM-800 nM
• Incubation Time: 48小时
• Method: 进行MTT实验和APO 2.7 染色分别测定细胞增殖和凋亡诱导。测定活细胞百分数作为可活力。通过APO 2.7染色测定凋亡。为了测定凋亡细胞中线粒体膜蛋白7A6的表达，用APO 2.7试剂处理细胞20分钟。使用EPICS XL流式细胞仪测定APO 2.7的表达。

动物实验

• Animal Models: 脂多糖(LPS)-诱导的Balb/c小鼠
• Formulation: 溶于1% CMC/溶于水的0.25% Tween-80
• Dosages: 0-20 mg/kg
• Administration: 口服处理，每天两次，持续14天