Loureirin B是一种从龙血树中提取的黄酮类化合物，是一种纤溶酶原激活物抑制剂（PAI-1）的抑制剂，IC50为26.10μM; 还抑制KATP，ERK和JNK的磷酸化，并具有抗糖尿病活性。

靶点&IC50

体外研究

Loureirin B增强了Pdx-1和MafA的相对mRNA水平。 Loureirin B（1，0.1和0.01μM）增加Ins-1细胞中的胰岛素分泌。 Loureirin B（0.01μM）几乎不会对细胞产生毒性。 Loureirin B提高MafA和Pdx-1和ATP水平的表达水平。 Loureirin B抑制KATP电流，但增加Ins-1细胞中的[Ca2 +] i水平。 Loureirin B抑制Col1和FN的表达，以及TGF-β1介导的p-JNK的上调。 Loureirin B还抑制由TGF-β1诱导的p-ERK的上调。此外，Loureirin B通过下调p-ERK和p-JNK来抑制TGF-β1刺激的成纤维细胞的收缩。然而，Loureirin B不抑制由TGF-β1诱导的p-p38的上调。在HS成纤维细胞中，Loureirin B以剂量依赖性方式下调I型胶原蛋白，III型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的mRNA和蛋白质水平。 Loureirin B还抑制成纤维细胞增殖活性并重新分配细胞周期，但不影响细胞凋亡。

体内研究

在兔耳瘢痕模型中，Loureirin B显着改善胶原纤维的排列和沉积，降低ColI，ColIII和α-SMA的蛋白质水平，并抑制肌成纤维细胞分化和瘢痕增殖活性。 在成纤维细胞中，Loureirin B有效抑制TGF-β1诱导的ColI，ColIII和α-SMA水平的上调，肌成纤维细胞分化和Smad2和Smad3的活化

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.1611 mL

15.8053 mL

31.6106 mL

5 mM

0.6322 mL

3.1611 mL

6.3221 mL

10 mM

0.3161 mL

1.5805 mL

3.1611 mL

• 将Ins-1细胞接种到96孔板上并培养48小时至约80-90％汇合。 然后，将细胞在2％FBS / DMEM中饥饿12小时。 对照组在不含路格瑞林B的培养基中培养，阳性对照组接受含格列美脲的新鲜培养基。 将路格瑞林B和格列美脲处理4和8小时后，通过细胞计数试剂盒-8（CCK-8）测量细胞活力。

动物实验

• Loureirin B在PBS中配制。
• 简而言之，将10只成年新西兰白色雄性兔子（每只2.0-2.5千克体重）适应并安置在标准的12小时光照下：12小时黑暗周期，并免费使用水和SPF基础日粮。首先用1％戊巴比妥（1.5mg / kg b.w.）麻醉兔子，然后在每只耳朵的腹侧表面上形成真皮穿刺活检（10×4mm）至裸露软骨以描绘出全层伤口。在八只兔子的每只耳朵上制作四个拳头伤口。使用解剖显微镜来确保每个伤口中的表皮，真皮和软骨膜完全去除。手术后48小时，将受伤的兔子随机分成两组，每组皮下注射左耳的DMSO溶液（0.125％，在PBS中，0.25mL / kg体重）或路格瑞林B溶液（PBS中25μg/ mL ，0.25毫升/千克体重）每隔一天一次，共6次。两只兔子用于试验性实验，损伤后14天处死四只兔子（n = 4），其余四只在损伤后28天（n = 4）处死。对同一只耳朵上的四个瘢痕组织中的两个进行蛋白质印迹处理，另外两个用于Masson染色。