Ixazomib;MLN2238抑制 20S proteasome的糜蛋白酶样蛋白水解位点(β5)，IC50和Ki分别为3.4 nM和0.93 nM, 也抑制caspase样 (β1) 和胰蛋白酶样(β2) 蛋白水解位点, IC50分别为31和3500 nM。

靶点

20S proteasome 
(Cell-free assay)

20S proteasome 
(Cell-free assay)

IC50

0.93 nM(Ki)

3.4 nM

体外研究

Ixazomib;MLN2238是氮端加帽的二肽亮氨酸硼酸，抑制20S 蛋白酶体的糜蛋白酶类(β5)水解位点，IC50为3.4 nM，Ki值为0.93 nM。更高浓度时, MLN2238也抑制20S蛋白酶体的caspase类水解 (β1)位点和胰蛋白酶类水解(β2)位点，IC50分别为31 nM和3.5 µM。MLN2238是蛋白酶体的有效选择性可逆抑制剂，这种可逆性存在时间依赖性。MLN2238抑制Calu-6细胞，IC50为9.7 nM。MLN2238作用于肿瘤细胞，为蛋白酶体的有效选择性可逆抑制剂。MLN2238和Bortezomib都为蛋白酶体的可逆抑制剂，都存在时间依赖性，但是MLN2238作用于蛋白酶体的分离半衰期比Bortezomib作用快6倍 (分别为18和110分钟)。MLN2238从蛋白酶体中分离比Bortezomib快,与Proteasome-Glo 实验中蛋白酶体活性更快恢复一致。 MLN2238 比Bortezomib具有更高的肿瘤药效。MLN2238是MLN9708的生物活性形式。

体内研究

Ixazomib;MLN2238作用于移植瘤时，比bortezomib产生更强的药效反应。与bortezomib相比，作用于移植瘤时，MLN2238显示更高的最大值和持久的抑制肿瘤蛋白酶效果。说明用MLN2238处理的肿瘤，药效反应得到明显提高。MLN2238作用于CWR22移植瘤显示抗癌活性。与bortezomib 相比，作用于WSU-DLCL2移植瘤模型，MLN2238显示更强的肿瘤药效反应。另外，作用于OCI-Ly10和PHTX22L模型，MLN2238比 bortezomib具有更高的药效和抗癌活性。

特征

Ixazomib;MLN2238是一流的蛋白酶抑制剂，在临床前期研究中，提高药物动力学活性，药效，及抗癌活性。

MLN9708

MB5137

MG132,蛋白酶体抑制剂

MB2634

PSI(蛋白酶体抑制剂);Proteasome Inhibitor 1

MB4176

MG-132-(R)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.7699 mL

13.8493 mL

27.6985 mL

5 mM

0.5540 mL

2.7699 mL

5.5397 mL

10 mM

0.2770 mL

1.3849 mL

2.7699 mL

50 mM

0.0554 mL

0.2770 mL

0.5540 mL

激酶实验:
Calu-6细胞培养在含10%FBS和1%青霉素/链霉素的MEM培养基中，1天后，按每孔1×104个细胞加到384孔板上。加入荧光酶素和 Proteasome-Glo检测试剂，观察糜蛋白酶类底物Suc-LLVY-aminoluciferin的水解，测定蛋白酶体活性。使用LEADseeker设备测定荧光值。

细胞实验：

• Cell lines: Calu-6 细胞
• Concentrations: 10nM 左右
• Incubation Time: 1小时或30分钟
• Method: Calu-6细胞培养在含10%FBS和1%青霉素/链霉素的MEM培养基中，1天后，按每孔1×104个细胞加到384孔板上。为了测定IC50值，用溶于DMSO (0.5%, v/v)的不同浓度bortezomib或MLN2238在37oC下处理细胞1小时。用于可逆性实验，用1 μmol/L bortezomib 或MLN2238在37oC下处理细胞30分钟，然后在培养基中洗三次洗去bortezomib或MLN2238。细胞在37oC下再温育4小时,然后移除培养基换上新的培养基。 

动物实验：

• Animal Models: 皮下注射5.0×106个MM.1S细胞的CB-17 SCID鼠
• Formulation: 溶于5% 2-羟丙基-β-环糊精
• Dosages: 11 mg/kg
• Administration: 静脉注射，每周两次，持续三周