Icotinib Hydrochloride (BPI-2009)是有效，选择性的 EGFR 抑制剂，IC50 值为5 nM；也抑制突变型EGFRL858R，EGFRL858R/T790M，EGFRT790M 和 EGFRL861Q。

靶点

IC50: 5 nM (EGFR)

体外研究

在0.5μm浓度下与Iconitib共同孵育，激酶活性抑制率分别为91%、99%、96%、61%和61%。IC50s为1、4.06、12.16、16.08、40.71μm时，IConib抑制a431和bgc-823 A549、h460和kb细胞株的增殖，当IC50s为1、4.06、12.16、16.08、40.71μm时，ICotinib仅对egfr及其突变体显示有意义的抑制活性。在人表皮样癌A431细胞系中，替尼可阻断EGFR介导的细胞内酪氨酸磷酸化（IC50=45 nM），并抑制肿瘤细胞增殖。

体内研究

在携带多种人类肿瘤来源异种移植物的裸鼠中，Icotinib表现出有效的剂量依赖性抗肿瘤作用。在小鼠中，该药物的耐受剂量高达120 mg/kg/天，在治疗期间没有死亡率或显著的体重减轻。在A431细胞系组中，以25.2%、45.6%和51.5%的速率抑制肿瘤生长；在A549细胞系组中，以3.4%、25.9%和31.0%的速率抑制肿瘤生长；在H460细胞系组中，以49.4%、52.6%和67.4%的速率抑制肿瘤生长；在30、60和120 mg/kg/剂量下，以30.3%、36.4%和46.5%的速率抑制肿瘤生长。

Tyrphostin 9

MB5251

WZ4002

MB3997

ZM306416

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.3371 mL

11.6855 mL

23.3710 mL

5 mM

0.4674 mL

2.3371 mL

4.6742 mL

10 mM

0.2337 mL

1.1686 mL

2.3371 mL

在体外激酶测定中，将2.4 ng /μLEGFR蛋白与32 ng /μLCrk在含有1μM冷ATP和1μCi32P-γ-ATP的25μL激酶反应缓冲液中混合。 将混合物与Icotinib在0,0.5,2.5,12.5或62.5nM下在冰上温育10分钟，然后在30℃温育20分钟。 在SDS样品缓冲液中于100℃淬灭4分钟后，通过在10％SDS-PAGE凝胶中电泳分离蛋白质混合物。 然后暴露干燥的凝胶以检测放射性。通过软件进行量化。

细胞实验

Iconitib在DMSO中制备。 
将细胞（1000个/孔）接种到含有10％FBS的RPMI-1640培养基中的96孔板中，并在37℃下在5％CO 2培养箱中生长。 24小时后，用Icotinib在0,0.78,1.56,3.125,6.25,12.5或25μM处理细胞96小时。 通过从第4天的平均吸光度值减去第0天的平均吸光度值来计算细胞增殖。

动物实验

对于含有0.5％CMC Na的水性载体中的每个剂量组，Icotinib以所需浓度悬浮 
小鼠： 
在携带A431，A549，H460和HCT8肿瘤异种移植物的小鼠中测定三剂Icotinib（30,60和120mg / kg /剂量p.o.qd）对抗肿瘤活性和存活的影响。 在这些实验中使用紫杉醇（30mg / kg /剂量，每周一次）作为阳性对照组。