GMX1778 (CHS828)是一种有效的特异性nicotinamide phosphoribosyltransferase (NAMPT)抑制剂，IC50 和 Kd分别为 < 25 nM 和120 nM。

靶点

体外研究

GMX1778通过抑制NAD+生物合成诱导NAD+消耗，随后导致ATP耗竭，最终使细胞死亡。GMX1778诱导程序性细胞死亡，并伴随凋亡特征。GMX1778通过下调IKK活性，抑制癌症细胞中核因子κB(IC50=8 nM)。

体内研究

在移植的裸鼠体内，GMX1778 (250 mg/kg, p.o.)对三种不同的人神经内分泌肿瘤，肠癌(GOT1)，胰腺癌(BON)，和甲状腺髓样癌(GOT2)表现出显著的抗肿瘤活性。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.6892 mL

13.4459 mL

26.8918 mL

5 mM

0.5378 mL

2.6892 mL

5.3784 mL

10 mM

0.2689 mL

1.3446 mL

2.6892 mL

50 mM

0.0538 mL

0.2689 mL

0.5378 mL

体外耦合酶 NAMPT 试验:
重组NAMPT活性使用基于NAD+定量的耦合酶测定进行评估。反应在室温下使用包含50 mM HEPES (pH 7.4)，50 mM KCl，5 mM MgCl2，0.5 mM β-巯基乙醇，0.005% 牛血清白蛋白，1% DMSO，2.0 U/ml乳酸脱氢酶，4 mM L-乳酸钠，0.4 U/ml 心肌黄酶，6 μΜ 刃天青钠盐，0.4 mM PRPP，3.0 nM NMNAT1，125 μM ATP，50 μM NM，和2-5 μM 重组NAMPT的混合物进行180分钟。荧光性使用Tecan Safire酶标仪(激发波长560 nm；发射波长590 nm)测量。Ki值使用Graphpad Prism 4.0软件和Cheng-Prusoff方程计算。

细胞实验

• Cell lines: HeLa 细胞
• Concentrations: ~100 nM
• Incubation Time: 72小时
• Method: GMX1778在DMSO中连续稀释以达到0.2% DMSO的终浓度。72小时后，相对ATP水平使用ViaLight HS高灵敏度细胞毒性和细胞增殖生物测定试剂盒根据制造商指示测定。对于GMX1778细胞毒性挽救实验，细胞用NA (10 μM)或NMN (100 μM)处理，同时使用GMX1778处理。S形剂量响应曲线使用4.00版 GraphPad Prism(GraphPad 软件) 通过可变斜率的非线性回归分析生成，以计算50%抑制(IC50)值。

动物实验

• Animal Models: 负荷中肠癌(GOT1)，胰腺癌(BON)和甲状腺髓样癌(GOT2)肿瘤的裸鼠
• Formulation: 悬浮在含2%羧甲基纤维素的0.9%生理盐水中
• Dosages: ~250 mg/kg
• Administration: p.o.