Brivanib Alaninate (BMS-582664)是BMS-540215的前体药物，是一种ATP竞争性的VEGFR2抑制剂，IC50为25 nM。

特性

BMS-540215的丙氨酸前体药物

靶点

体外研究

BMS-582664抑制VEGF和FGF刺激的HUVECs 增殖，IC50分别为40 nM 和276 nM。BMS-582664 (2 μM)作用于VEGF和 bFGF刺激的SK-HEP1细胞和 HepG-2细胞,显著抑制VEGFR-2，FGFR-1，ERK1/2和Akt的磷酸化，而 BMS-582664单独作用于未经刺激的细胞，则对ERK1/2, Akt, VEGFR-2, 和FGFR-1的磷酸化水平没有影响。BMS-582664 抑制 CYP2C19, CYP3A4(BFC) 和 CYP3A4 (BzRes)，IC50分别为2.4 μM, 0.51 μM 和 1.6 μM。BMS-582664具有高的固态稳定性（在放置干燥剂的12周期间50°C下仅有0.3％降解），在pH为6.5时也具有可观的液态稳定性。

体内研究

BMS-582664 (50 mg/kg) 处理小鼠，AUC为 136 μM×hr，Cmax 为41 μM。BMS-582664 (60 mg/kg,口服)处理小鼠，迅速被吸收，Tmax 为1小时, 半衰期 (t1/2)为 2.7小时，平均滞留时间 (MRT) 为 3.6 小时。BMS-582664 (25 mg/kg)处理大鼠，AUC为13.4 μM×hr，Cmax为6.4 μM。 BMS-582664 处理携带H3396移植瘤的无胸腺小鼠，抑制肿瘤生长，按60 mg/kg 和 90 mg/kg 剂量处理，肿瘤生长抑制率分别为85% 和 97%，这种作用存在剂量依赖性。BMS-582664按 50 mg/kg 和 100 mg/kg剂量处理携带病患衍生的移植瘤06-0606 的小鼠，抑制肿瘤生长速度分别为 55% 和13%。BMS-582664（60 mg/kg,口服）作用于携带病患衍生的移植瘤06-0606 的小鼠，显着降低肿瘤重量，促进细胞凋亡，降低微血管密度，抑制细胞增殖，并下调细胞周期调控。BMS-582664 处理携带L2987 非小细胞肺癌移植瘤的无胸腺小鼠，抑制肿瘤生长，按80 mg/kg 和 107 mg/kg 剂量处理，肿瘤生长抑制率分别为85% 和 97% ，这种作用存在剂量依赖性。BMS-582664 (100 mg/kg) 作用于两种携带移植瘤的小鼠模型，L2987 和 HCT116，抑制血管内皮细胞的新增长。

BFH772

MB3946

BMS-794833

MB3945

Ki8751

MB3995

Telatinib

MB3158

阿帕替尼甲磺酸盐

MB3992

瓦他拉尼(PTK787 ) 2HCl

MB2944

瓦特拉尼碱

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.2652 mL

11.3261 mL

22.6521 mL

5 mM

0.4530 mL

2.2652 mL

4.5304 mL

10 mM

0.2265 mL

1.1326 mL

2.2652 mL

50 mM

0.0453 mL

0.2265 mL

0.4530 mL

激酶抑制试验:
VEGFR-2, Flk-1和 FGFR-1激酶实验中, BMS-582664溶于 DMSO，使用水/10% DMSO稀释到最终DMSO浓度为2%。激酶反应包含如下：8 ng含 GST 标签的酶, 75 μg/mL 底物, 1 μM ATP, 和 0.04 μCi [γ-33P]ATP，总反应体积为50 μL (激酶 buffer:  20 mM Tris, pH 7.0, 25 μg/mL BSA, 1.5 mM MnCl2, 0.5 mM 二硫苏糖醇)。反应在27°C下开始进行60分钟，加入预冷的三氯乙酸 (TCA)终止反应，终浓度为15%。通过非线性回归分析测定激酶抑制百分数，数据表示为IC50。

细胞实验：

• Cell lines: HUVECs 细胞系
• Concentrations: 276 nM
• Incubation Time: 72 小时
• Method: 细胞按每孔2 × 103个的密度生长在IV型胶原包被的96孔板中，孔中含100μL最低生长培养基和1.0％热灭活的胎牛血清，细胞生长在37°C/ 5％CO2的环境下。24小时后, 血清调整到10%, 每孔加入不同稀释浓度的BMS-582664。48小时后, 在20μL最低生长培养基 中加入0.5 μCi [3H]胸甘，反应24 小时。实验板在中冲洗一次。除去PBS后，胰蛋白酶加入到细胞中，随后使用自动收集器收集到玻璃纤维过滤器上。使用β-计数器测量氚的渗透率，绘制剂量反应曲线测定IC50值。

动物实验：

• Animal Models: 携带H3396移植瘤的无胸腺小鼠
• Formulation: PEG 400:水(7:3)
• Dosages: 90 mg/kg
• Administration: 口服