265.3

化学式

C14H19NO4

CAS号

22862-76-6

稳定性

3 years -20°C powder

41 mg/mL warmed (154.54 mM)

Ethanol

17 mg/mL warmed (64.07 mM)

Water

Insoluble

Anisomycin 是一种抗生素，抑制蛋白质合成，也是一种 JNK 激活剂。

靶点

体外研究

Anisomycin（3 μM）可降低MDA16和MDA-MB-468细胞中的蛋白质合成，减少MDA-MB-468细胞的集落形成。Anisomycin可促进MDA-MB-468细胞的凋亡，但不促进MDA16细胞的凋亡。在MDA-MB-468细胞中，anisomycin可激活JNK的磷酸化。在U251和U87细胞中，anisomycin（0.01-8μM）可时间依赖性和浓度依赖性地抑制细胞生长，其IC50值（48 h）分别为0.233和0.192 μM。Anisomycin（4 μM）可分别引起21.5%和25.3%的U251和U87细胞凋亡，并激活p38 MAPK和JNK活性，使ERK1/2失活。Anisomycin（4 μM）可时间依赖性地降低U251和U87细胞中PP2A/C亚基水平。Anisomycin可浓度依赖性地抑制EAC细胞增殖

JNK磷酸化:
以500000细胞/孔的密度接种细胞于6孔板中培养过夜。细胞用测试样品和作为空白对照的DMSO（终浓度1%，v/v）处理1 h。加入嘌呤霉素（终浓度为18 μM），继续培养10 min标记新生多肽链。背景值通过不加入嘌呤霉素培养细胞测定。然后在HBSS中洗涤细胞，通过刮取并离心收集细胞（300 g，离心5 min）。细胞重悬浮在含有磷酸酶抑制剂的0.5 mL 50 mM DTT中，95℃孵育10 min。随后样品经液氮快速冷冻，-20℃保存。样本（20–30 μg 蛋白/样本）被转移到PVDF膜。将膜封闭，并用anti-phospho-Thr183/Tyr185-JNK抗体在4℃孵育过夜。使用二抗标记一抗，用红外扫描仪检测。anti-phospho-JNK的荧光信号需经背景校正处理。

细胞实验

• Cell lines: 埃利希腹水癌（EAC）细胞
• Concentrations: 500 ng/mL
• Incubation Time: 48 h
• Method: EAC细胞以10,000个细胞/孔/200 µL培养基的密度接种至96孔板中。细胞用不同浓度anisomycin处理48 h。Adriamycin（500 ng/mL）为阳性对照组。每孔加入0.5 mg/mL MTT，4 h 后，加入DMSO溶解MTT产物，Model 680酶标仪测定570 nm 处吸光值。

动物实验

• Animal Models: 雄性BALB/c小鼠
• Formulation: PBS
• Dosages: 5 mg/kg
• Administration: 瘤旁注射