ZM 447439是一种选择性的，ATP竞争性Aurora A和Aurora B抑制剂，IC50分别为110 nM和130 nM，作用于Aurora A/B比作用于MEK1， Src， Lck选择性高8倍，对CDK1/2/4， Plk1， Chk1等几乎没有作用效果。

特性

ZM-447439是Aurora选择性ATP竞争性抑制剂

靶点

体外研究

体外, ZM-447439 选择性抑制重组人类Aurora A和B,IC50分别为110和130 nM,而抑制其他不同结构类型蛋白激酶，包括有丝分裂激酶CDK1和PLK1时，IC50>10 μM。Aurora 激酶抑制剂, ZM-447439 抑制BON, QGP-1和MIP-101三种细胞系生长，连续处理72小时，IC50分别为3 μM , 0.9 μM 和3 μM，这种作用存在时间和剂量依赖性。此外, ZM-447439通过促进DNA分裂和 caspase 3 和7激活,有效诱导细胞凋亡，且使GEP-NET细胞在G0/G1期和G2/M期停顿。在小鼠胚胎中, ZM-447439 抑制Aurora 激酶,通过在每个胚胎周期使用不同干扰，调节G2到中期的组蛋白H3 serine 10 (H3S10Ph)而使前两次分裂发生异常。最新研究显示ZM-447439作用于宫颈癌SiHa细胞，抑制生长和凋亡，且增强对Cisplatin的化学敏感性。

ZM 447439

MB4031

SNS-314 Mesylate

MB4027

Alisertib (MLN8237)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.9471 mL

9.7354 mL

19.4708 mL

5 mM

0.3894 mL

1.9471 mL

3.8942 mL

10 mM

0.1947 mL

0.9735 mL

1.9471 mL

50 mM

0.0389 mL

0.1947 mL

0.3894 mL

体外激酶实验:
使用杆状病毒表达体系，表达重组Aurora A和B作为氨基末端His6标记融合蛋白。使用Ni-NTA琼脂糖，通过亲和层析纯化Aurora A，使用CM Sepharose Fast Flow，通过离子交换层析纯化Aurora B。1 ng 纯化的重组酶加到反应中，反应中含 25 mM Tris-HCl, pH 7.5, 12.5 mM KCl, 2.5 mM NaF, 0.6 mM DTT, 6.25 mM MnCl2, 10 μM 肽底物, 10 μM ATP（Aurora A），5 μM ATP（Aurora B）, 和0.2 μCi γ[33P]ATP (比活≥2,500 Ci/mmol), 然后在室温下温育60分钟。加入20% 磷酸反应终止，使用P30硝化纤维过滤器获得产物， 使用Beta 板TM计数器测定33P摄入率。

细胞实验

Cell lines: BON, QGP-1和MIP-101

• Concentrations: 0到5 μM
• Incubation Time: 72小时
• Method: 通过结晶紫染色测评细胞数。细胞接种在96孔板上，与1% 戊二醇混合。细胞用0.1% 结晶紫染色。用水冲洗未结合的染料。用0.2% Triton X-100溶解结合的结晶紫。使用ELISA读数器在570 nm处分析线性增加的细胞数。