NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,O-糖蛋白酶,#P0761S

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶

O-糖蛋白酶

#P0761S 200 reactions

产品描述

 O-糖蛋白酶是一种高度特异性的蛋白酶,用于切割糖蛋白或糖肽上的肽键,该酶特异性识别粘蛋白型 O-连接糖(无论是否唾液酸化)的丝氨酸或苏氨酸残基,在其 N端进行切割。

产品特点

 ·用于 O-糖基化位点测定和 O-糖结构测定

·有效切割糖蛋白(无论是否唾液酸化),无需神经氨酸酶处理

·为重组酶,无其它蛋白酶污染

·可在变性或非变性条件下使用

·不含甘油,便于在 HPLC MS 分析中取得最佳效果。

·以溶液形式提供;具有长达 24 个月的最佳活性和稳定性

产品说明

 O-糖蛋白酶是一种高度特异性的蛋白酶,用于切割糖蛋白或糖肽上的肽键,该酶特异性识别粘蛋白型 O-连接糖(无论是否唾液酸化)的丝氨酸或苏氨酸残基,在其 N 端进行切割。O-糖蛋白酶含有 6 × His-tag,使用镍亲和树脂可轻松从反应体系中去除

 

来源:

基因克隆自铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),在 E. coli 中表达。

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,Xa 因子蛋白酶,#P8010L

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶

Xa 因子蛋白酶

#P8010L 250 μg

#P8010S 50 μg

#P8010V 25 μg

识别位点

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶

概述

Xa 因子蛋白酶的常见切割位点位于 Ile-(Glu/Asp)-Gly-Arg 序列中的精氨酸残基之后。根据蛋白质底物构象的不同,Xa 因子蛋白酶有时也可在其它碱性氨基酸残基处进行切割。在这些已经测序的次级识别位点中,最常见是 Gly-Arg 序列。在 E.coli 中不稳定的蛋白质和被 Xa 因子次级识别位点切割的蛋白质之间似乎存在某种相关性;这似乎表明这些蛋白是处于部分未折叠的状态。Xa 因子蛋白酶不切割位于脯氨酸或精氨酸之前的氨基酸位点。

来源

Xa 因子蛋白酶是从牛血浆纯化得到,并经鲁塞尔(Russell)喹蛇毒液中的活化酶活化处理。

分子量

Xa 因子的主要形式分子量约为 43 kDa,包含两条由二硫键相连的 27 kDa 和 16 kDa 的肽链。SDS-PAGE 电泳时,还原条件下两条链的分子量分别显示为 30 kDa 和 20 kDa。

单位定义

在 6 小时或更短时间内,1 μg 的 Xa 因子能够使 50 μg 测试底物实现 95% 的切割,单位检测条件请登陆  www.neb-china.com,www.neb.com。

浓度

1 mg/ml。

清除

Xa 因子能与苯甲脒-琼脂糖(如:GE Life Science #17-5143-02)发生特异性结合而被清除。

上海金畔生物科技有限公司官网,NEB代理,订购热线:18301939375

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,肠激酶-轻链,#P8070L

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶

肠激酶,轻链

#P8070L 2,560 units

#P8070S 480 units

识别位点

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶

概述

肠激酶是一种特异性蛋白酶,其识别序列为Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,切割位点位于赖氨酸残基之后。根据蛋白质底物构象的不同,肠激酶有时也可在其它碱性氨基酸残基处进行切割。肠激酶不切割脯氨酸之前的氨基酸位点。

来源

由克隆有牛肠激酶轻链基因的乳酸克鲁维酵母(K. lactis)菌株纯化而来。

分子量

肠激酶轻链分子量为 26.3 kDa。SDS-PAGE电泳时表观分子量为 31 kDa。

单位定义

1 单位指 25μl 反应体系中,25℃ 条件下,16 小时内,能使 25μg 测试底物(MBP-EKparamyosin-ΔSal)达到 95% 的切割所需要的酶量。单位检测条件请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

浓度

16,000 U/ml。

清除

肠激酶能通过与交联有胰蛋白酶抑制剂的琼脂糖(如:Sigma T-0637)特异性结合而清除。

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,Furin 蛋白酶,#P8077L

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶

Furin 蛋白酶

#P8077L 250 units

#P8077S 50 units

识别位点

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概述

Furin 蛋白酶是一种类似枯草杆菌蛋白酶的蛋白质前体转化酶。它是分泌途径中的主要加工酶,定位于高尔基体反面的网状结构部位。其底物包括:凝血因子,血清蛋白和生长因子受体(如:胰岛素样生长因子受体)。最短的切割识别位点是:Arg-X-X-Arg。然而,该酶倾向作用于 Arg-X-(Lys/Arg)-Arg▼ 位点。在 P6 位置的额外精氨酸似乎能增强切割效率。Furin 活性受 EGTA、α1-抗胰蛋白酶硅酸盐和聚精氨酸化合物抑制。
 注意:底物的三维结构以及切割位点周围的氨基酸类型会影响 Furin 蛋白酶的切割特异性。

来源

分离自草地夜蛾(Spodopter afrugiperda,又称秋粘虫)Sf9 细胞,该细胞感染有截短型人 Furin 基因的重组杆状病毒(R. Fuller 惠赠)。

分子量

截短型人Furin 蛋白的分子量为 52.7 kDa,SDS-PAGE 电泳时的表观分子量为 57 kDa。

单位定义

1 单位指 30℃ 条件下,1 分钟内从荧光肽 BOC-RVRR-AMC(Bachem #I-1645)上释放 1 pmol AMC 所需要的酶量,单位检测条件请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

浓度

2,000 units/ml。

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,蛋白内切酶 GluC,#P8100S

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶

蛋白内切酶 GluC

#P8100S 50 μg

识别位点

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特性

 通过质谱进行蛋白质组学分析的理想用酶
 可用于蛋白和多肽的鉴定
 从蛋白酶缺陷型枯草芽孢杆菌中表达,无其它蛋白酶污染

概述

蛋白内切酶 GluC(又称金黄色葡萄菌 V8 蛋白酶)是丝氨酸蛋白酶,能选择性切割谷氨酸羧基端的肽键,同时也能够切割天冬氨酸残基,但其反应速率要比前者慢 100-300 倍。

来源

克隆自金黄色葡萄球菌(Stophylococcus aureus)V8 蛋白酶基因,在枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)中表达。

反应条件

1X GluC 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl,0.5 mM Glu-Glu (pH 8.0 @ 25℃)],37℃ 温育。

随酶提供的试剂

2X GluC 反应缓冲液。

分子量

29,849 daltons。

重溶

用 50-500 μl 的高纯水溶解。快速自裂解效率随酶浓度不同而异。

注意事项

以液态形式于 -20℃ 可贮存 2 周,但液态形式保存会降低其活性。欲达到最佳效果,请使用新鲜重溶的蛋白酶。

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,胰蛋白酶-ultra-质谱级,#P8101S

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶

胰蛋白酶-ultra,质谱级

#P8101S 100 μg

识别位点

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特性

 蛋白酶解产物可用于质谱分析蛋白质组
 可用于蛋白和多肽的鉴定
 TPCK 处理去除胰凝乳蛋白酶活性
 无蛋白酶污染

概述

胰蛋白酶-ultra,质谱级是一种丝氨酸肽链内切酶类,可特异性地切割赖氨酸和精氨酸残基的C 端肽键。经甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲酮(TPCK)处理的胰蛋白酶-ultra,质谱级灭活了残留的胰凝乳蛋白酶活性。赖氨酸残基的 ε-氨基基团进行乙酰化修饰,以防止酶自裂解。经 TPCK 处理过的质谱级胰蛋白酶-ultra,切割赖氨酸-脯氨酸和精氨酸-脯氨酸之间的肽键速率比切割其它氨基酸残基要慢得多。

来源

来自牛(Bos taurus)胰脏。

反应条件

1X 胰蛋白酶-ultra 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl,20 mM CaCl2(pH 8.0 @ 25 ℃)],37℃ 温育。

随酶提供的试剂

2X 胰蛋白酶-ultra 反应缓冲液。

分子量

23,675 daltons。

重溶

用 20-200 μl 的高纯水溶解。快速自裂解效率随酶浓度不同而异。

注意事项

以液态形式于 -20℃ 可贮存 1 周,但液态形式保存会降低活性。欲达到最佳效果,请使用新鲜重溶的蛋白酶。

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,蛋白内切酶 AspN,#P8104S

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶

蛋白内切酶 AspN

#P8104S 50 μg

识别位点

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特性

 通过质谱进行蛋白质组学分析的理想用酶
 无蛋白酶污染
 最适用于多肽的鉴定

概述

蛋白内切酶 AspN(flavastacin)是锌金属内切肽酶,能选择性切割天冬氨酸残基的 N-端肽键。

来源

纯化自脑膜脓毒性黄杆菌(Flavobacterium menigosepticum)。

反应条件

1X AspN 反应缓冲液 [50 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 37℃),2.5 mM ZnSO4],37℃ 温育。

随酶提供的试剂

2X AspN 反应缓冲液。

分子量

40,089.9 daltons。

质量保证

蛋白内切酶AspN不含甘油和去污剂,因此避免了这些物质对基质辅助激光解吸/离子飞行时间质谱(MALDI-TOF)、电喷雾电离(ESI)质谱(MS)或液相色谱(LC)可能产生的干扰。

重溶

蛋白内切酶 AspN 应使用 50-500 μl 的高纯水溶解,快速自裂解效率随酶浓度不同而异。

注意事项

以液态形式于 -20℃ 可贮存 2 周,但液态形式保存会降低活性。为达到最佳效果,请使用新鲜重溶的蛋白酶。

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,蛋白酶 K,分子生物学级,#P8107S

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶

蛋白酶 K,分子生物学级

#P8107S 2 ml

特性

 用于抽提质粒和基因组 DNA
 用于抽提 RNA
 灭活反应中的 RNase、DNase 和酶类产品

概述

蛋白酶 K 是一种能够水解多种肽键的枯草杆菌蛋白酶相关丝氨酸蛋白酶。

来源

白色念球菌(Tritirachium album)。

反应条件

蛋白酶 K 在多种缓冲液中均有活性,包括 NEB 的限制性内切酶缓冲液。该酶在pH 7.5到 12.0 及温度 20℃ 到 60℃ 之间均有很高活性。蛋白酶 K 在含有 EDTA 等螯合剂的缓冲液中有活性,当反应中加入多达 2% 的 SDS 或 4M 的尿素时,酶的活性会提高。
钙离子对于蛋白酶 K 的热稳定性非常重要,但对于催化活性不是必须的,因此蛋白酶 K 在有 EDTA 等鳌合剂的缓冲液中依然有活性。

分子量

28.9 kDa。

质量保证

蛋白酶 K 经过严格的质量监控,确保功能及纯度都达到最高。

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下(pH7.5),1 分钟内所消化尿素变性的血红蛋白能够与 1 μmol 福林酚试剂定量的  L-酪氨酸具有相同吸光度所需的酶量。

浓度

800 units/ml。

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 蛋白酶,热敏蛋白酶 K,#P8111S

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 蛋白酶

热敏蛋白酶 K

#P8111S 30 units

特性

  用于抽提质粒和基因组 DNA

 用于抽提 RNA
 灭活反应中的 RNase、DNase 和酶类产品
 去除 DNA 中的酶来提升克隆效率
 可用于 PCR 纯化

概述

 热敏蛋白酶 K 是经过生物工程改造,能够水解多种肽键的枯草杆菌相关丝氨酸蛋白酶

来源

 克隆自白色侧赤霉菌(Engyodontium album),也称白色念球菌(Tritirachium album)。经过突变提高热敏感性,于乳酸克鲁维酵母中表达(K.lactis)

分子量

 29,000 daltons

反应条件

 热敏蛋白酶 K 在多种缓冲液中均有活性。在pH 7.0 到 9.5 及温度 20℃ 到 40℃之间均能达到很高活性,在含有 EDTA 等螯合剂的缓冲液中也具活性,当反应中加入多达 1% 的 SDS,仍具活性。

单位定义

 1 单位指 105 μl 反应体系中 25℃ 条件下,每分钟从 N-琥珀酰-Ala-Ala-Pro-Phe-双硝基苯胺中释放 1 μmol 4-硝基苯胺所需的酶量。

浓度

 120 units/ml