XL765是双重mTOR/PI3K抑制剂,最有效作用于p110γ，IC50为9 nM;也抑制DNA-PK 和 mTOR。

靶点

p110α

p110β

p110γ

p110δ

mTOR

IC50

39 nM

113 nM

9 nM

43 nM

～150 nM

体外研究

XL765是第一个口服的PI3K和mTOR双重抑制剂，作用于p110α, β, γ, δ, 和mTOR时IC50分别为39, 113, 9, 43, 和～150 nM。在体外，XL765按浓度依赖方式降低细胞活力。

体内研究

XL765口服饲喂处理，导致中期肿瘤的下降数，比对照组高12倍。XL765不管是单独作用，还是和其他药物联用作用于各种GBM移植瘤，都显示出活性。XL765作用于体外培养的人类移植瘤，导致PI3K下游磷酸化蛋白：pAkt 和pPRAS40，及mTOR下游磷酸化蛋白：pS6 和p4EBP1的减量调节。

TG100-115

MB5302

VS-5584

MB5319

XL-147

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.6676 mL

8.3381 mL

16.6761 mL

5 mM

0.3335 mL

1.6676 mL

3.3352 mL

10 mM

0.1668 mL

0.8338 mL

1.6676 mL

50 mM

–

–

–

• Cell lines: 恶性胶质瘤细胞
• Concentrations: 10 mM
• Incubation Time: 72小时
• Method:

细胞接种24小时后用XL765处理， 24，48，或72小时后采集细胞用于凋亡或自吞噬试验。细胞凋亡通过荧光激活细胞分选法(FACS)根据膜联蛋白V阳性细胞的总百分比测定。酸性自噬泡(AVOs)在XL765处理的细胞中通过吖啶橙活体染色检测。AVO形成的程度以XL765处理细胞与对照组细胞相比，吖啶橙荧光强度(FL3)的增加倍数表示。

动物实验

• Animal Models: 4到6周大的无胸腺Foxn1nu裸鼠
• Formulation: 10 mM HCl
• Dosages: 50 mg/kg
• Administration: 口服饲喂，每天2次。

Saracatinib (AZD0530)是一种有效的Src抑制剂，无细胞试验中IC50为2.7 nM，对c-Yes， Fyn， Lyn， Blk， Fgr和Lck也具有活性；但对Abl和EGFR (L858R和L861Q)活性较低。

特性

Saracatinib是第一个作用于人类肿瘤组织Src通路的抑制剂。

靶点

体外研究

Saracatinib也有效抑制其他Src酪氨酸激酶家族成员，包括c-Yes, Fyn, Lyn, Blk, Fgr, 和Lck，IC50为4到10 nM。Saracatinib有效抑制SrcY530F突变的NIH 3T3细胞，IC50为80 nM。在NBT-II膀胱癌细胞中，Saracatinib显著阻断HT1080细胞通过立体骨胶原基质的入侵，且完全抑制EGF诱导的细胞分散。Saracatinib作用于DU145和PC3细胞，通过抑制Y419磷酸化而有效抑制Src激活。Saracatinib抑制前列腺癌包括PC3, DU145, CWR22Rv1和 LNCaP的生长，而Saracatinib作用于 LAPC-4, PZ-HPV7和RWPE-1细胞时却显示低活性。Saracatinib使细胞周期停止在G1/S期，但是不使caspase 3断裂。Saracatinib 也明显抑制Boyden 小室的DU145和PC3 移动。Saracatinib有效且持久抑制Akt，且增强A549和Calu-6细胞对放射处理的敏感性。Saracatinib在活性，再吸收，及组成上抑制蚀骨细胞。Saracatinib也可逆阻断蚀骨细胞前体的移动

体内研究

Saracatinib作用于Src3T3异体移植物显示出强的肿瘤生长抑制率，且Saracatinib造成Calu-6, MDA-MB-231, AsPc-1和BT474C移植瘤生长适当延迟。Saracatinib处理常位DU145鼠，按鼠体重，每千克每天口服处理25mg Saracatinib，结果显示出强的抗癌活性

激酶实验:
使用受体和非受体酪氨酸激酶的重组催化区，通过酶联免疫吸附法测定酪氨酸激酶活性的IC50值。加入的Saracatinib剂量从0.001到10 mM不等。针对丝氨酸/苏氨酸激酶的特定实验是加32P 的渗透捕捉实验。在加入10 μL 20mM Mg.ATP开始反应前，包含0.5 μL Saracatinib或DMSO（作对照) 或pH 3.0 buffer（作对照）的多支路384孔板加入15 μL酶和肽/蛋白底物温育5分钟。 所有酶的最终浓度都接近米氏常数（Km）。实验在室温下进行30分钟，然后加入5 μL正磷酸终止反应。混合后，孔中的内含物加到P81联合板上，使用正磷酸作为洗涤缓冲液，然后计算IC50值。

细胞实验：

• Cell lines: PC3, DU145, CWR22Rv1, LNCaP, LAPC-4, PZ-HPV7，和RWPE-1细胞
• Concentrations: 62.5 nM-16 mM
• Incubation Time: 1, 3，和5天
• Method: PC3, DU145, CWR22Rv1, LNCaP, LAPC-4, PZ-HPV7 及RWPE-1细胞按2×103密度接种在96孔板上，温育过夜。加入浓度不等（62.5 nM-16 mM）的Saracatinib。1,3,5天后分离培养基，每孔加入0.2 mL DMSO，按每分钟200轮持续震荡96孔板15分钟。MTT实验测IC50值。

动物实验：

• Animal Models: 移植DU145细胞的CB17鼠
• Formulation: 溶于0.5% 羟丙基甲基纤维素和0.1% Tween-80中
• Dosages: 25 mg/kg
• Administration: 每天口服处理

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.8449 mL

9.2246 mL

18.4492 mL

5 mM

0.3690 mL

1.8449 mL

3.6898 mL

10 mM

0.1845 mL

0.9225 mL

1.8449 mL

50 mM

0.0369 mL

0.1845 mL

0.3690 mL