日度归档：2022年11月10日

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 糖苷内切酶

发表于由
产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 糖苷内切酶

糖苷内切酶 Hf                             

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 糖苷内切酶 NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 糖苷内切酶 NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 糖苷内切酶

货 号
规 格
价 格(元)
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广州库存
成都库存
苏州库存

#P0703L
500,000 units.
3,129.00
有
有
无
无
无

#P0703S
100,000 units
769.00
有
有
无
无
无

      


识别位点

 

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 糖苷内切酶

 

Endo H 和 Endo Hf 仅切割高甘露糖型结构（high mannose structures）（n = 2-150，x =
(Man)1-2，y = H）和杂合型结构（hybrid structures）（n = 2，x 和/或 y = AcNeu-Gal-GlcNAc）。

特性

 去除糖蛋白中的 N-连接高甘露糖

概述

糖苷内切酶 Hf 是糖苷内切酶 H 和麦芽糖结合蛋白组成的融合重组蛋白，具有与糖苷内切酶 H 相同的活性。

来源

糖苷内切酶 Hf 克隆自褶皱链霉菌（Streptomyces plicatus）并在 E. coli 中高度表达。

反应条件

将糖蛋白在 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40 mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性，再在
1X GlycoBuffer 3 反应缓冲液中于 37℃ 温育。热失活：65℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 3 反应缓冲液

分子量

Endo Hf：70,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染，无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃ 条件下，1 小时从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量（10 NEB units = 1 IUBmilliunit）。

浓度

Endo Hf 浓度：1,000,000 units/ml。

注意事项

酶活性不受 SDS 影响。

要使天然糖蛋白去糖基化，可能需要增加酶量并延长温育时间。

上海金畔生物科技有限公司官网，NEB代理，订购热线：18301939375

有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。

NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析,SNAP-Surface 启动试剂盒,#E9120S

发表于由
产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

SNAP-Surface 启动试剂盒

#E9120S 1套

特性

 详细简便的标记步骤
 附有超强且特性明确的荧光基团
 包含对照质粒；能对表达蛋白进行精确的亚细胞定位
 无论检测蛋白位于细胞内还是细胞表面，都能提供精确定位

概述

为使研究者快速、简便地应用我们的蛋白质标记系统，我们的启动试剂盒提供了标记 SNAP-tag 或 CLIP-   tag 融合蛋白的所有必需组份，能在活细胞、固定细胞及体外将红色或绿色荧光基团共价连接到目标蛋白上。每种启动试剂盒包括一种编码所选 tag 的质粒和两种细胞通透性的或细胞非通透性的荧光标记物。试剂盒同时提供相应阳性对照质粒，其编码有明确亚细胞定位的标签蛋白（如：膜蛋白、核蛋白等）。试剂盒还会提供一个与目的标签相互作用的非荧光的阴性对照阻断剂。

荧光基团

每种荧光基团的亮度和稳定性都经过严格的验证。另外，每种荧光基团还要通过以下检测：细胞通透性（ SNAP-Cell 和 CLIP-Cell 产品）或特异性标记细胞表面蛋白的能力（SNAP-Surface，CLIP-Surface）。

NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析

SNAP-Cell TMR-Star 和 CLIP-Cell TMR-Star 是光稳定的红色荧光底物，可用于分别标记活细胞内部、固定化细胞内部、细胞表面或体外的 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白。这些细胞通透性底物为四甲基罗丹明衍生物，可用标准罗丹明滤镜成像。当它们共价连接于 SNAP-tag 或 CLIP-tag 蛋白质后，能在波长 554   nm 处被激发，释放出波长为 580 nm 的荧光。
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析
SNAP-Cell 505-Star 和 CLIP-Cell 505 是光稳定的绿色荧光底物，可用于分别标记活细胞内部、固定化细胞内部、细胞表面或体外的 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白。这些细胞通透性底物可用标准荧光滤镜成像。当它们共价连接于 SNAP-tag 或 CLIP-tag 蛋白质后，能在 504 nm 波长处被激发，释放出波为 532    nm 的荧光。
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析
SNAP-Surface 549 是光稳定的荧光底物，可以用于标记溶液中或活细胞表面的 SNAP-tag 融合蛋白。该细胞非通透性底物适于使用标准 TAMRA 或 Cy3 滤镜成像。当它们共价连接于 SNAP-tag 融合蛋白后，能在 560 nm 波长处被激发，释放出波长为 575 nm 的荧光。
SNAP-Surface 488 和 CLIP-Surface 488 是光稳定的荧光底物，可用于分别标记溶液中、活细胞表面或固定化细胞表面的 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白。这些细胞非通透性底物可用标准荧光滤镜成像。当它们共价连接于 SNAP-tag 或 CLIP-tag 融合蛋白后，能在 506 nm 波长处被激发，释放出波长为 526 nm 的荧光。
CLIP-Surface 547 是光稳定的红色荧光底物，可分别用于标记活细胞表面的 CLIP-tag 融合蛋白。这些细胞非通透性底物适于使用标准 TAMRA 或 Cy3 滤镜成像。当它们分别共价连接于 CLIP-tag 融合蛋白后，能在 554 nm 波长处被激发，释放出波长为 568 nm 的荧光。

相关产品

SNAP-Cell 启动试剂盒（停产，组分可单独购买）

SNAP-Surface 启动试剂盒

NEB代理 , 表观遗传学 , 表观遗传学,EpiMark 重亚硫酸盐转化试剂盒,#E3318S

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产品资料 – 表观遗传学 – 表观遗传学

EpiMark 重亚硫酸盐转化试剂盒

#E3318S 48 次反应

特性

 完全转化未修饰的胞嘧啶为尿嘧啶
 简单明了的实验步骤
 稳定可靠的结果
 提供纯化柱

概述

重亚硫酸盐转化试剂盒可以检测每个胞嘧啶基团的甲基化状态，并可根据大规模测序要求进行相应调整。该试剂盒能将未修饰的胞嘧啶转化为尿嘧啶，而 5-mC 和 5-hmC 修饰的胞嘧啶则不被改变。借助在重亚硫酸钠中进行加热、变性交替循环处理，重亚硫酸盐转化试剂盒可以检测到甲基化修饰的胞嘧啶。试剂盒提供所有试剂包括离心柱。经重亚硫酸盐处理后的样本，可用 EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶进行扩增。

重亚硫酸盐转化试剂盒包含以下组份

 – 偏重亚硫酸钠

– 溶解缓冲液
– 脱磺化反应缓冲液
– EpiMark 离心柱及 2 ml 收集管
– 结合缓冲液
– 洗涤缓冲液
– 洗脱缓冲液

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NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 糖苷内切酶

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产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 糖苷内切酶

PNGase F                             

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货 号
规 格
价 格(元)
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苏州库存

#P0704L
75,000 units
7,539.00
有
有
有
有
有

#P0704S
15,000 units
1,899.00
有
有
有
有
有

      


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Endoglycosidase Reaction Buffer Pack

识别位点

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 糖苷内切酶

PNGase F 几乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有 N-连接糖 [x = H 或寡糖]。
 

特性

 去除糖蛋白的 N-连接糖

 更多详细结构特异性请翻阅目录 257 页 

概述

PNGase F 是一种酰胺酶，切割糖蛋白上的 N-连接糖，切割的糖型有：高甘露糖、杂合和复杂寡糖，切割位点为：最内侧的 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之间。PNGase F 还提供不含甘油的形式，便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。

来源

NEB #P0704 和 NEB #P0705 是从脑膜败血性黄杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化。
 
NEB #P0708 和 NEB #P0709 克隆自和平空间站伊丽莎菌（Elizabethkingia miricola，formerly Flavobacteriummeningosepticum）并在 E. coli 中高度表达。

反应条件

将糖蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性，再在加入1% NP-40 的 1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中，37℃ 温育进行反应。热失活：75℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 2 缓冲液
10% NP-40

分子量

36,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶 F1、F2和 F3 活性，无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃ 条件下 ,1 小时 从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量。

浓度

500,000 units/ml。

注意事项

已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反应混合物中必须加入 NP-40。
 
要使天然糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。

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有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。

NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析,pSNAP-tag(T7)-2 载体,#N9181S

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产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

pSNAP-tag(T7)-2 载体

#N9181S 20 µg

特性

 提供可在哺乳动物和细菌中表达的载体
NEB代理 , 细胞分析 , 细胞影像学及分析
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概述

NEB 提供几种表达载体，该载体能表达携带有 SNAP-tag 和 CLIP-tag 的融合蛋白，适用于在哺乳动物及细菌中标记，相应的启动试剂盒也包含有相应的载体。哺乳动物 SNAPf 和 CLIPf 载体表达 SNAP- 和 CLIP-tags 的速度较之前的载体更快。表达载体中，tag 的上、下游具有改造后的多克隆位点，使得 tag 可以表达在目的蛋白的任何一端，该表达过程受 CMV 启动子调控。SNAPf-tag 和 CLIPf-tag 表达载体中携带新霉素抗性基（NeoR），可用于筛选稳定转染子。载体上还带有一个 IRES 元件，有助于融合蛋白和 NeoR 的高效表达。为在哺乳动物细胞中高效表达，Tag 基因中的密码子已经过优化。NEB 还提供对照质粒，这些质粒编码的融合蛋白分别定位于细胞（H2B）、线粒体（Cox8A）和细胞表面（ADRβ2, NK1R），启动试剂盒中包含相应的对照质粒（见 290 页）。
细菌表达载体 pSNAP-tag(T7)-2 包含位于 SNAP-tag 上、下游的克隆位点，受 T7启动子调控。为在E. coli中高效表达，SNAP-tag 基因中的密码子已经过优化。

来源

通过标准的质粒纯化程序，分离自 E. coli 菌株。质粒无内毒素污染，可用于高效转染。

浓度

500 μg/ml。

限制图谱

pSNAPf 载体的详细描述和限制性酶切图谱请见 389 页。查看所有表达载体和对照质粒的序列和图谱文件，请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。
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NEB代理 , 表观遗传学 , 表观遗传学,T4 噬菌体 β-葡糖基转移酶,T4-BGT,#M0357L

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产品资料 – 表观遗传学 – 表观遗传学

T4 噬菌体 β-葡糖基转移酶（T4-BGT）

#M0357L 2500 units

#M0357S 500 units

特性

 糖基化 DNA 中 5-羟甲基胞嘧啶
 免疫检测 DNA 中 5-羟甲基胞嘧啶
 通过与 [3H] 或 [14C]-UDP-葡萄糖一起孵育将 [3H] 或 [14C]-葡萄糖掺入到含有 5-羟甲基胞嘧啶的 DNA 受体中，对 5-羟甲基胞嘧啶残基进行标记
 通过核酸内切酶保护分析检测 DNA 中的 5-羟甲基胞嘧啶

概述

T4 噬菌体 β-葡糖基转移酶能特异性地将尿嘧啶二磷酸葡萄糖（UDP-Glc）的葡萄糖基团转移至双链 DNA 的 5-羟甲基胞嘧啶残基上，形成 β-葡糖基-5-羟甲基胞嘧啶。

来源

携带 T4 噬菌体 bgt 基因克隆的大肠杆菌菌株。

反应条件

1X NEBuffer 4 和 40 μM UDP-葡萄糖，37℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。

随酶提供的试剂

10X NEBuffer 4
50X UDP-葡萄糖（2 mM）

单位定义

1 单位是指能够保护 0.5 μg T4gt-DNA 免受 MfeI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度

10,000 units/ml

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发表于由
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PNGase F ( 无甘油 )                             

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货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
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广州库存
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苏州库存

#P0705L
75,000 units
7,539.00
有
有
有
有
有

#P0705S
15,000 units
1,899.00
有
无
有
有
有

      


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RNase B（对照底物）

Endoglycosidase Reaction Buffer Pack

识别位点

NEB代理 , 糖生物学与蛋白质工具 , 糖苷内切酶

PNGase F 几乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有 N-连接糖 [x = H 或寡糖]。

特性

 去除糖蛋白的 N-连接糖
 更多详细结构特异性请翻阅目录257页

概述

PNGase F 是一种酰胺酶，切割糖蛋白上的 N-连接糖，切割的糖型有：高甘露糖、杂合和复杂寡糖，切割位点为：最内侧的 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之间。PNGase F 还提供不含甘油的形式，便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。

来源

NEB #P0704 和 NEB #P0705 是从脑膜败血性黄杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化。
 
NEB #P0708 和 NEB #P0709 克隆自和平空间站伊丽莎菌（Elizabethkingia miricola，formerly Flavobacteriummeningosepticum）并在 E. coli 中高度表达。

反应条件

将糖蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性，再在加入1% NP-40 的 1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中，37℃ 温育进行反应。热失活：75℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 2 缓冲液
10% NP-40

分子量

36,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶 F1、F2和 F3 活性，无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃ 条件下 1 小时 从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量（65 NEB units = 1 IUB milliunit）。

浓度

500,000 units/ml。

注意事项

已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反应混合物中必须加入 NP-40。要使天然糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。
 
要使非变性糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。

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有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。