292.12

化学式

C13H7Cl2N3O

CAS号

200626-61-5

稳定性

3 years -20°C powder

2 years -80°C in solvent

58 mg/mL (198.54 mM)

Ethanol

5 mg/mL (17.11 mM)

Water

<1 mg/mL 难溶或者不溶

IU1是一种细胞渗透性的,可逆的proteasome（蛋白酶）选择性抑制剂，作用于USP14 时，IC50为4.7 μ M，比作用于IsoT 选择性高25倍。

靶点

USP14

IC50

4.7 μM

体外研究

IU1特异性结合到USP14的活性形式。IU1抑制USP14，通过抑制其对接到蛋白酶体上，而对8种其他DUBs, IsoT, UCH37, BAP1, UCH-L1, UCH-L3, USP15, USP2, USP7很少或根本没有抑制活性。加入IU1，快速抑制USP14，移除后，抑制迅速得到逆转。IU1抑制USP14诱导的链修饰，且降低Ub-CCNB类型的电泳迁移率。在有USP14存在时，IU1增强蛋白酶体的Ub-CCNB降解。在蛋白毒性机制研究中，IU1促进tau的退化，且降低TDP-43, ATXN3，和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）。

MB3664

P22077

MB4183

ML323

MB4588

Degrasyn (WP1130)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.3292 mL

16.6461 mL

33.2923 mL

5 mM

0.6658 mL

3.3292 mL

6.6585 mL

10 mM

0.3329 mL

1.6646 mL

3.3292 mL

50 mM

0.0666 mL

0.3329 mL

0.6658 mL

高通量筛选:
使用ICCB-Longwood 筛选设施进行筛选。使用Wellmate实验板分配器将10 μL重组USP14蛋白按一式两份分配到384孔低体积板的各孔中。使用Seiko pin转移自动系统将33.3 nL化合物从库中转移到孔中，然后预温育约30分钟。实验中每块板的最后两列用于阳性和阴性对照。使用Wellmate分配器将10 μL VS-蛋白酶 加 Ub-AMC混合物加到各孔中，启动酶反应。样品再温育45分钟。使用Envision酶标仪在Ex355/Em460测量Ub-AMC水解。USP14, VS-蛋白酶和 Ub-AMC 的终浓度分别为 15 nM, 1 nM 和 0.8 μM。实验化合物的终浓度约为17 μM。酶和底物在Ub-AMC实验缓冲液（50 mM Tris-HCl(pH 7.5), 1 mM EDTA, 1 mM ATP, 5 mM MgCl2, 1 mM DTT, 和 1 mg/Ml 卵清蛋白）中制备。

细胞实验：

• Cell lines: MEF细胞
• Concentrations: ~1.5 mM
• Incubation Time: 48小时
• Method: MTT法

IWP-2抑制Wnt信号和分泌，IC50为27 nM,选择性抑制Porcn介导的Wnt棕榈酰化，一般不影响Wnt/β-catenin，且对Wnt刺激的细胞反应没有影响。

靶点

 Wnt

IC50

 27 nM

体外研究

IWP-2在再生医学和抗癌方面都非常有效。IWP-2使Porcn失活, Porcn是一种与O-酰基转移酶(MBOAT)结合的膜,且选择性抑制Wnt棕榈酰化。IWP-2抑制Lrp6受体和Dvl2发生Wnt依赖性的磷酸化，也抑制β-catenin累积。

特性

 Selective inhibitor of Porcn-mediated Wnt secretion.

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.1432 mL

10.7158 mL

21.4316 mL

5 mM

0.4286 mL

2.1432 mL

4.2863 mL

10 mM

0.2143 mL

1.0716 mL

2.1432 mL

50 mM

–

–

–

• Cell lines: L-Wnt-STF cells
• Concentrations: 5 μM
• Incubation Time: 24 h
• Method:

L-Wnt-STF cells that exhibit constitutive Wnt pathway activation were incubated with IWR (10μM) and IWP (5μM) compounds for 24 hrs prior to lysis. Cellular lysates were subjected to Western blot analysis.

动物实验

• Animal Models: Crl:CD1 (ICR) and FVB/N female mice
• Formulation: encapsulated in liposomes
• Dosages: 50 µg
• Administration: s.c.

IWP-4 是一种小分子 Wnt 抑制剂，其 IC50 值为 25 nM。

靶点

IC50: 25 nM (Wnt)[

体外研究

IWP4是一种小分子Wnt抑制剂，IC50为25 nm。IWP4诱导心肌标志物的表达，包括心肌肌钙蛋白I（cTnI）和心肌肌球蛋白重链亮细胞（MyHHI+）。IWP- 4也导致跳动灶的出现（每秒0.44±0.10次SEM搏动），在不接受IWP－4的所有培养物中都不存在。流式细胞仪分析显示，IWP- 4处理的培养液中MyHLO细胞数量明显多于对照组（P＜0.0002），第16天为17±1.3 SD%和5.4±1.4 SD%。NKX2-5蛋白表达的定量显示，63%（481/817）的IWP4处理的细胞显示核NKX2-5表达。IWP4处理的间充质前体细胞（MPCs）在第7天与单纯成骨培养基相比，AXIN 2、CTNNB1和GSK3B的表达无明显变化，而IWP4表达的MPCs则在第21天升高DKK1和GSK3β的水平。IWP4也引起SPARC和COL1A1的显著下调。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.0136 mL

10.0681 mL

20.1361 mL

5 mM

0.4027 mL

2.0136 mL

4.0272 mL

10 mM

0.2014 mL

1.0068 mL

2.0136 mL

HESC培养物在MTESR-1培养基中获得，并随着日培养基的交换而扩大，直到菌落达到理想水平（～70%～80%）。此时（标记第0天），将MTESR-1替换为含有2% B27补充剂和1%青霉素/链霉素的RPMI 1640培养基组成的基础培养基。在基础培养基中加入20 ng/ml BMP-4和/或6 ng/mL激活素A，并每日交换至第3天。然后，将具有或不含5毫米IWP4的基础培养基添加到细胞中，每2天交换一次[二甲基亚砜（DMSO）在相同的浓度下用作车辆控制物]直到第15天，之后基础培养基每2天供应一次。

472.58

化学式

C25H20N4O2S2

CAS号

1427782-89-5

稳定性

3 years -20°C powder

2 years -80°C in solvent

25 mg/mL warmed (52.9 mM)

Water

<1 mg/mL 难溶或者不溶

Ethanol

<1 mg/mL 难溶或者不溶

IWP-L6是高效强效的Porcn的抑制剂，EC50为0.5 nM。

靶点

体外研究

IWP-L6阻断HEK293细胞中细胞质Wnt通路效应器Dvl2的磷酸化作用。在培养的胚肾中，IWP-L6也会通过可逆阻断Wnt信号而抑制Wnt介导的分支形态发生。

体内研究

IWP-L6在人血浆中能够稳定24小时以上，而在大鼠血浆(t1/2 = 190 分钟)，小鼠血浆 (t1/2 = 2 分钟)，和小鼠肝脏S9组分中迅速代谢。在斑马鱼胚胎中，IWP-L6有效抑制后侧枢椎形成，一种Wnt/β连环蛋白依赖性发展过程。

IWR-1 (endo-IWR 1)是Wnt通路抑制剂，IC50为180 nM,诱导Axin2蛋白水平，且促进β-catenin磷酸化。

靶点

 Wnt

IC50

 180 nM

体外研究

IWR-1 和XAV939作为Wnt通路的可逆抑制剂，在体内外具有相似的药理作用，IWR-1通过与Axin相互作用而发挥效果,而XAV939直接与TNKS结合。

Wnt-C59 (C59)

MB4054

IWP-2

MB4053

KY02111

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.4424 mL

12.2118 mL

24.4236 mL

5 mM

0.4885 mL

2.4424 mL

4.8847 mL

10 mM

0.2442 mL

1.2212 mL

2.4424 mL

50 mM

0.0488 mL

0.2442 mL

0.4885 mL

Ixabepilone是一种具有口服活性的微管抑制剂。它与微管蛋白tubulin结合，促进微管蛋白聚合和微管稳定，因此使细胞停留在细胞周期G2-M期，诱导肿瘤细胞的凋亡。

靶点

体外研究

BMS-247550是一种高度有效的细胞毒素剂，能够在低浓度下杀死癌细胞，在人类耐paclitaxel或对paclitaxel不敏感的癌症中仍然具有其抗肿瘤活性。

体内研究

在体内实验中，在耐paclitaxel和paclitaxel敏感的肿瘤中，BMS-247550的抗肿瘤活性都比paclitaxel要更好。在研究中，BMS-247550在5种耐paclitaxel的肿瘤中都比paclitaxel更有效。对于三种对paclitaxel敏感的人类肿瘤异种移植模型中，BMS-247550与paclitaxel的抗肿瘤作用一样。

ABT-751 (E7010)

MB4674

CW069

MB6175

Maytansinol

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.9736 mL

9.8678 mL

19.7355 mL

5 mM

0.3947 mL

1.9736 mL

3.9471 mL

10 mM

0.1974 mL

0.9868 mL

1.9736 mL

50 mM

0.0395 mL

0.1974 mL

0.3947 mL

• Cell lines: HCT116人体肿瘤细胞株
• Concentrations: 7.5 nM
• Incubation Time: 1, 2, 4, 8, 16, and 24 h
• Method: 用7.5 nM BMS-247550处理1, 2, 4, 8, 16, and 24 h后，胰蛋白酶化收集HCT116细胞。细胞用80%乙醇固定后置于−20°C，过夜后，用PBS缓冲液对细胞进行复水，用含0.1% RNase的碘化丙啶(5 μg/ml)对之进行DNA染色。

动物实验

• Animal Models: 人类肿瘤异种移植模型（BALB/c nu/nu 裸鼠）
• Formulation: (a) 乙醇：水 (1:9, v/v), (b) Cremophor:乙醇:水 (1:1:8, v/v)
• Dosages: 不同的浓度
• Administration: 静脉注射或口服 

Ixazomib;MLN2238抑制 20S proteasome的糜蛋白酶样蛋白水解位点(β5)，IC50和Ki分别为3.4 nM和0.93 nM, 也抑制caspase样 (β1) 和胰蛋白酶样(β2) 蛋白水解位点, IC50分别为31和3500 nM。

靶点

20S proteasome 
(Cell-free assay)

20S proteasome 
(Cell-free assay)

IC50

0.93 nM(Ki)

3.4 nM

体外研究

Ixazomib;MLN2238是氮端加帽的二肽亮氨酸硼酸，抑制20S 蛋白酶体的糜蛋白酶类(β5)水解位点，IC50为3.4 nM，Ki值为0.93 nM。更高浓度时, MLN2238也抑制20S蛋白酶体的caspase类水解 (β1)位点和胰蛋白酶类水解(β2)位点，IC50分别为31 nM和3.5 µM。MLN2238是蛋白酶体的有效选择性可逆抑制剂，这种可逆性存在时间依赖性。MLN2238抑制Calu-6细胞，IC50为9.7 nM。MLN2238作用于肿瘤细胞，为蛋白酶体的有效选择性可逆抑制剂。MLN2238和Bortezomib都为蛋白酶体的可逆抑制剂，都存在时间依赖性，但是MLN2238作用于蛋白酶体的分离半衰期比Bortezomib作用快6倍 (分别为18和110分钟)。MLN2238从蛋白酶体中分离比Bortezomib快,与Proteasome-Glo 实验中蛋白酶体活性更快恢复一致。 MLN2238 比Bortezomib具有更高的肿瘤药效。MLN2238是MLN9708的生物活性形式。

体内研究

Ixazomib;MLN2238作用于移植瘤时，比bortezomib产生更强的药效反应。与bortezomib相比，作用于移植瘤时，MLN2238显示更高的最大值和持久的抑制肿瘤蛋白酶效果。说明用MLN2238处理的肿瘤，药效反应得到明显提高。MLN2238作用于CWR22移植瘤显示抗癌活性。与bortezomib 相比，作用于WSU-DLCL2移植瘤模型，MLN2238显示更强的肿瘤药效反应。另外，作用于OCI-Ly10和PHTX22L模型，MLN2238比 bortezomib具有更高的药效和抗癌活性。

特征

Ixazomib;MLN2238是一流的蛋白酶抑制剂，在临床前期研究中，提高药物动力学活性，药效，及抗癌活性。

MLN9708

MB5137

MG132,蛋白酶体抑制剂

MB2634

PSI(蛋白酶体抑制剂);Proteasome Inhibitor 1

MB4176

MG-132-(R)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.7699 mL

13.8493 mL

27.6985 mL

5 mM

0.5540 mL

2.7699 mL

5.5397 mL

10 mM

0.2770 mL

1.3849 mL

2.7699 mL

50 mM

0.0554 mL

0.2770 mL

0.5540 mL

激酶实验:
Calu-6细胞培养在含10%FBS和1%青霉素/链霉素的MEM培养基中，1天后，按每孔1×104个细胞加到384孔板上。加入荧光酶素和 Proteasome-Glo检测试剂，观察糜蛋白酶类底物Suc-LLVY-aminoluciferin的水解，测定蛋白酶体活性。使用LEADseeker设备测定荧光值。

细胞实验：

• Cell lines: Calu-6 细胞
• Concentrations: 10nM 左右
• Incubation Time: 1小时或30分钟
• Method: Calu-6细胞培养在含10%FBS和1%青霉素/链霉素的MEM培养基中，1天后，按每孔1×104个细胞加到384孔板上。为了测定IC50值，用溶于DMSO (0.5%, v/v)的不同浓度bortezomib或MLN2238在37oC下处理细胞1小时。用于可逆性实验，用1 μmol/L bortezomib 或MLN2238在37oC下处理细胞30分钟，然后在培养基中洗三次洗去bortezomib或MLN2238。细胞在37oC下再温育4小时,然后移除培养基换上新的培养基。 

动物实验：

• Animal Models: 皮下注射5.0×106个MM.1S细胞的CB-17 SCID鼠
• Formulation: 溶于5% 2-羟丙基-β-环糊精
• Dosages: 11 mg/kg
• Administration: 静脉注射，每周两次，持续三周

JIB-04 is a pan-selective Jumonji histone demethylase inihibitor with IC50s of 230, 340, 855, 445, 435, 1100, and 290 nM for JARID1A, JMJD2E, JMJD3, JMJD2A, JMJD2B, JMJD2C, and JMJD2D, respectively.

IC50 & Target

IC50: 230 nM (JARID1A), 445 nM (JMJD2A), 435 nM (JMJD2B), 1100 nM (JMJD2C), 290 nM (JMJD2D), 340 nM (JMJD2E), 855 nM (JMJD3)

体外

JIB-04 is consistently selective for cancer vs. normal cells, demonstrated by the higher sensitivity of lung and prostate cancer lines (with IC50 as low as 10 nM) compared to HBECs and PrSCs/PrECs. JIB-04 inhibits cellular Jumonji demethylase activity, and Jumonji levels affect JIB-04 action in cells. JIB-04 significantly inhibits the proliferation of GB cell lines and stem-enriched cultures. JIB-04 exerts its maximal inhibitory activity against KDM5A, and modulates the expression of genes involved in the control of cancer cell growth and leads to hypermethylation of H3K4. Furthermore, JIB-04 (2500 nM) activates the autophagy and apoptotic pathways and inactivates PI3K. JIB-04 also cooperates with TMZ in killing GB cells.

体内

JIB-04 results in a significant reduction in cancer-induced death rates in mice, prolonging survival. JIB-04 (60, 40 and 20 mg/kg, i.p.) reaches bioactive concentration in the brain of the mice. The orthotopic GB xenograft model shows a trend toward longer survival in JIB-04-treated mice with an Hazard Ratio of 0.5.

For cell viability assays, cells are plated at 1500-3000 cells/well in 96 well plates and treated the next day with increasing doses of compound over 4 days and their viability assessed by standard MTS assays using Promega’s Cell Titer or Cell Titer-Glo reagents. Absorbance at 490 nm and 650 nm or luminescence is measured by a Spectra Max or a FlouroStar Omega plate reader. Data are normalized to the untreated controls (100% viability). Each cell line is tested in 2-5 independent assays, each containing 4-8 replicates. IC50 values are calculated using DIVISA, a high-throughput software, developed in house, for storing and analyzing drug sensitivity assays. Dose-response curves are plotted using a non-linear regression model and IC50s are determined from the fitted curves. The average IC50 derived from 2-5 independent assays, each containing 4-8 replicates is reported.

动物实验

For xenografts, 4-6 week old female nude mice are housed under standard conditions in a clean facility at UTSW. Two million H358 cells or five million A549 cells are injected subcutaneously and allowed to grow for 2-3 weeks with monitoring. When tumors reach appr 200 mm3, therapy is started in weight and tumor volume matched pairs (n=7 for each treatment group for each cell line). Drug or vehicle is administered by inter-peritoneal injection in 10% DMSO 90% sesame oil 2 to 3 times weekly for 5 weeks at 110 mg/kg to all mice harboring H358 xenografts or 3 times per week by gavage in 12.5% Cremophor EL, 12.5% DMSO as an aqueous suspension at 55 mg/kg to mice harboring A549 xenografts. Tumor volumes are monitored twice weekly by caliper measurements. Animals are weighed and observed during the five weeks of treatment. At the end point, mice are euthanized by CO2 asphyxiation and cervical dislocation, and blood, tumors and major organs collected and weighed. Paired, unequal variance, one-tailed t-tests are performed across treatment groups using Excel software. 

SP600125

MB6045

LY294002

MB1087

盐酸多柔比星/盐酸阿霉素

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.2388 mL

16.1938 mL

32.3876 mL

5 mM

0.6478 mL

3.2388 mL

6.4775 mL

10 mM

0.3239 mL

1.6194 mL

3.2388 mL

Quisinostat (JNJ-26481585)是有口服活性，高效的 HDAC 抑制剂，对HDAC1的 IC50 值为0.11 nM。

靶点

体内研究

Quisinostat以纳摩尔浓度对广泛的癌细胞系（包括肺癌，结肠癌，乳腺癌，前列腺癌和卵巢癌细胞系）发挥广谱抗增殖活性。 JNJ-26481585显示对所有测试的HDAC酶的活性，在体外观察到重组HDAC1的最高效力（IC50,0.11±0.03 nM），这与从肿瘤细胞中观察到的HDAC1免疫沉淀复合物的效力相当（IC50,0.16±0.02 nM））。 对HDAC6,7和9观察到最低的体外效力（IC50,32.1-119nM）。

体外研究

JNJ-26481585在体内诱导肿瘤组织中的连续H3乙酰化。 JNJ-26481585，一种“第二代”HDAC抑制剂，在体内具有延长的药效学反应。 与该假设一致，与临床前肿瘤模型中的标准护理剂和第一代HDAC抑制剂相比，JNJ-26481585显示出优异的功效。 这些研究表明具有连续药效学活性的HDAC抑制剂可能在实体瘤恶性肿瘤中显示出活性。

PCI-34051

MB6006

Pracinostat (SB939)

MB3565

Quisinostat (JNJ-26481585) 2HCl

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.5350 mL

12.6752 mL

25.3505 mL

5 mM

0.5070 mL

2.5350 mL

5.0701 mL

10 mM

0.2535 mL

1.2675 mL

2.5350 mL

将JNJ-26481585作为5mM储备溶液溶解在DMSO中，并用合适的培养基稀释。 将人A2780卵巢肿瘤细胞（107细胞/小鼠）皮下注射。 进入雄性无胸腺nu / nu CD-1小鼠的腹股沟区域。 当获得可触知的肿瘤时，每天用载体（10％羟丙基-β-环糊精）或JNJ-26481585以10mg / kg ip处理小鼠一次，并且在指定时间在第1天和第7天收获肿瘤和血浆。 分（5只小鼠/点）。 使用定量ELISA（300ng肿瘤蛋白/孔）测定AcH3的水平，并基于间接响应药效学模型进行描述。