描述

Dasabuvir (ABT-333) 是一种非核苷抑制剂，抑制RNA依赖性的 HCV NS5B 基因编码的 RNA 聚合酶，抑制 HCV 基因型 1a 和 1b 临床分离株衍生的重组 NS5B 聚合酶，IC50 为 2.2 到 10.7 nM。

IC50 & Target

体外

Dasabuvir (ABT-333) is at least 7,000-fold selective for the inhibition of HCV genotype 1 polymerases over human/mammalian polymerases. Dasabuvir (ABT-333) inhibits the polymerase enzymatic activity of genotype 1 laboratory strain enzymes (H77, BK, N, and Con1 strains), as well as enzymes produced from polymerase genes from HCV genotype 1-infected subjects, with IC50s between 2.2 and 10.7 nM. Dasabuvir (ABT-333) inhibits replication of HCV subgenomic replicons in cell culture assays, with EC50 values of 7.7 and 1.8 nM against genotype 1a (H77) and 1b (Con1), respectively. In the presence of 40% human plasma, there is a 12- to 13-fold decrease in inhibitory potency, yielding EC50s of 99 and 21 nM for HCV genotype 1a (H77) and 1b (Con1) replicons, respectively.

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.0261 mL

10.1303 mL

20.2606 mL

5 mM

0.4052 mL

2.0261 mL

4.0521 mL

10 mM

0.2026 mL

1.0130 mL

2.0261 mL

50 mM

0.0405 mL

0.2026 mL

0.4052 mL

Dasatinib Monohydrate 是一种新型有效的多靶点抑制剂，作用于靶点Abl，Src 和 c-Kit，IC50分别为 <1 nM，0.8 nM 和 79 nM。

靶点

体外研究

Dasatinib比imatinib更有效地抑制表达野生型Bcr-Abl 和Bcr-Abl突变体的Ba/F3细胞的增殖，T315I突变体除外。相对于imatinib，Dasatinib具有双对数(∼325倍)增加的效能。Dasatinib有效抑制野生型Abl激酶和除T315I外小范围的所有突变体。Dasatinib直接靶向作用于所有突变型Abl激酶域，并以浓度依赖的方式抑制自身磷酸化和底物磷酸化。与imatinib相比，Dasatinib对表达野生型Bcr-Abl的细胞表现出325倍的效能。TgE骨髓细胞集落百分数在未处理的孔中为100%，在Dasatinib处理的孔中降低为4.12%。在Dasatinib存在下，WT和TgE骨髓细胞形成的集落百分比在统计学上具有显著差异。LMP2A的表达能够促进B淋巴细胞存活和增殖，这能够被以Lyn 和/或c-Abl激酶为靶点的Dasatinib抑制。Dasatinib治疗抑制一部分甲状腺癌细胞中Src信号，减少生长，并诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。以逐渐增加剂量的纳摩尔级浓度的Dasatinib (0.019 μM到1.25 μM)治疗3天，抑制大约50%的C643，TPC1，BCPAP，和SW1736细胞系生长，而抑制K1细胞系的生长需要更高浓度。10 nM 或50 nM Dasatinib治疗导致BCPAP ，SW1736和 K1细胞中G1期细胞增加9-22%，而S期细胞相应减少7-18%。

体内研究

Dasatinib逆转LMP2A/MYC双重转基因小鼠体内的脾肿大。在TgE 小鼠体内，Dasatinib特异性防止LMP2A表达的骨髓B细胞形成集落，并减少脾脏大小。与对照组相比，Dasatinib治疗的Tg6/λ-MYC小鼠中，脾脏肿块显著减小。Dasatinib抑制LMP2A/MYC双重转基因小鼠体内的淋巴结肿大。从LMP2A/MYC双重转基因小鼠移植肿瘤细胞的Rag1KO小鼠体内，Dasatinib逆转脾肿大。Dasatinib治疗抑制表达LMP2A的B淋巴肿瘤细胞中Lyn磷酸化。

Dasatinib(BMS-354825)

MB1072-S

达沙替尼（无水）（标准品）

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.9762 mL

9.8810 mL

19.7621 mL

5 mM

0.3952 mL

1.9762 mL

3.9524 mL

10 mM

0.1976 mL

0.9881 mL

1.9762 mL

50 mM

–

–

–

激酶自磷酸化测定:
激酶试验使用野生型和突变型谷胱甘肽S转移酶(GST)-Abl融合蛋白(c-Abl 氨基酸220-498)进行。GST-Abl在使用前从谷胱甘肽-琼脂糖珠中释放；ATP浓度为5 μM。在用于激酶磷酸化和体外多肽底物磷酸化试验之前，GST-Abl激酶域融合蛋白立即用LAR酪氨酸磷酸酶处理。在30℃下培养1小时后，LAR磷酸酶通过加入钒酸钠(1 mM)灭活。比较未处理的GST-Abl激酶和去磷酸化的GST-Abl激酶，免疫印记分析按照常规进行，使用磷酸酪氨酸特异性抗体4G10以确定酪氨酸残基完全去磷酸化(>95%)，使用c-Abl抗体CST 2862确定GST-Abl激酶等量加入。对于突变型T315I，Dasatinib浓度范围扩展到1,000 nM。这些同样的抑制剂浓度用于体外多肽底物磷酸化试验。测试三个抑制剂在相同浓度范围内对GST-Src 激酶和GST-Lyn激酶的抑制作用。

细胞实验

• Cell lines: Ba/F3 细胞系
• Concentrations: ~32 nM
• Incubation Time: 72小时
• Method: Ba/F3细胞系以一式三份接种，并与逐渐增加浓度的Dasatinib培养72小时。使用基于甲烷硫代磺酸盐的活性试验测量增殖。IC50和IC90值以重复四次的三个独立实验平均值确定。抑制剂浓度范围为0 nM到32 nM (Dasatinib)。对于突变型T315I，Dasatinib浓度范围扩展到200 nM。

动物实验

• Animal Models: EμLMP2A (TgE和Tg6菌株)，MYC (λ-MYC)，和LMP2A/λ-MYC 双重转基因小鼠(Tg6/λ-MYC)
• Formulation: DMSO
• Dosages: 30 mg/kg
• Administration: 腹腔注射给药

TESTS

SPECIFICATIONS

RESULTS

Appearance

Off white to pale yellow powder

Conforms

Identification

HNMR

Conforms

Solubility

50mg/ml DMSO,clear

Conforms

Purity(HPLC)

≥99%

99.0%

Conclusion

Passed

DBeQ是选择性的，有效的，可逆的，ATP竞争性的p97 抑制剂，IC50 为 1.5 μM。

靶点

p97

IC50

1.5 μM

体外研究

DBeQ作用于HeLa细胞，抑制UbG76V-GFP, ODD-Luc和Luc-ODC 降解，IC50分别为2.6 μM, 56 μM 和45 μM。DBeQ作用于N-ethylmaleimide-敏感因子（NSF）和26S蛋白酶，效果至少低50倍。DBeQ与ATP竞争性抑制P97，Ki为3.2 μM，说明DBeQ结合到D2域的活性位点。DBeQ (10 μM) 作用于HEK293细胞，有效抑制TCRα-GFP降解。DBeQ作用于HEK293细胞，3小时内诱导CHOP，但不增加p21水平，这种作用存在浓度依赖性。DBeQ (15 μM) 作用于Hela细胞，诱导LC3-II 在在细胞核及浓缩膜和胞质级组分中大量积累。DBeQ作用于HeLa细胞，通过抑制LC3-II自噬降解，而不是诱导自噬，而发挥作用。DBeQ (10 μM) 作用于HeLa细胞，快速促进caspases-3和-7激活。比激活外在caspase-8通路，DBeQ更有效激活内在caspase-9凋亡途径，而STS激活两种途径程度相似。DBeQ作用于 多发性骨髓瘤细胞（RPMI8226）比作用于正常人胚肺成纤维细胞（MRC5）效果强5倍，HeLa细胞和Hek293细胞具有中等的敏感性。在ERAD和自噬途径内，DBeQ干扰底物降解。DBeQ (12 μM) 作用于HeLa细胞中。抑制细胞中和，这种作用存在剂量依赖性。DBeQ(10 μM)完全抑制病毒和抗体的降解，但不抑制IgG Fc的降解。DBeQ作用于U20S细胞，降低基本的和营养刺激的MTOR靶点磷酸化，与Rapamycin 效果类似。

特征

DBeQ快速有效地诱导caspase激活和细胞死亡。

NMS-873

MB3831

MNS (3,4-Methylenedioxy-β-nitrostyrene, MDBN)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.9375 mL

14.6877 mL

29.3755 mL

5 mM

0.5875 mL

2.9375 mL

5.8751 mL

10 mM

0.2938 mL

1.4688 mL

2.9375 mL

50 mM

0.0588 mL

0.2938 mL

0.5875 mL

手动ATP酶实验:
实验 Buffer [20 μL 2.5×浓度, 1×= 50 mM Tris (pH 7.4), 20 mM MgCl2, 1 mM EDTA, 和 0.5 mM tris(2-carboxyethyl)phosphine (TCEP)] 加到96孔板中。纯化的p97(25 μL 50 μM) 975 μL 1× 实验 Buffer中稀释，然后每孔中加入10 μL。每孔加入DBeQ (10 μL) 或 5% DMSO (10 μL) ，实验板在室温下温育10分钟。按如下进行ATP酶实验：每孔加入10 μL 500 μM ATP (pH 7.5), 在室温下温育60分钟, 然后加入50 μL Kinase Glo Plus 试剂,随后在室温下黑暗环境中温育10分钟。使用 Analyst AD读取发光值。在一个浓度范围(0, 0.048, 0.24, 1.2, 6, 和30 μM)按一式三份测定DBeQ。

细胞实验：

• Cell lines: MRC-5, Hek293, HeLa 和 RPMI8226 细胞
• Concentrations: 33 μM
• Incubation Time: 48 小时
• Method: 细胞按每孔5,000个接种于384孔白色固体板中。使用荧光素酶siRNA或p97siRNA（10 nM）进行细胞转染48小时，或在指定时间使用DBeQ处理。每孔加入Caspase-3/7 Glo, caspase-6 Glo, caspase-8 Glo, 或 caspase-9 ，按500rpm震荡混合 1分钟。在室温下温育1小时后，测定发光信号。使用CellTiter-Glo试剂测定细胞存活力。为了测定细胞活力的IC50，使用七种浓度的MG132或DBeQ（开始于μM的三倍连续稀释液）处理细胞48小时。拟合发光信号归一化DMSO处理细胞的百分比，计算IC50值。

DCC-2036是Bcr-Abl抑制剂，作用于Abl1(WT)和Abl1(T315I)，IC50分别为0.8 nM 和 4 nM,也抑制SRC, LYN, FGR, HCK, KDR, FLT3, 和 Tie-2, 对c-Kit具有低的抑制活性。

靶点

u-ABL1native

p-ABL1native

ABL1H396P

u-ABL1T315I

p-ABL1T315I

IC50

0.8 nM

2 nM

1.4 nM

5 nM

4 nM

体外研究

DCC-2036有效抑制纯化的未磷酸化(u-ABL1native)和磷酸化 (p-ABL1native) ABL1, 未磷酸化和磷酸化突变型ABL1T315I, 及激活环突变ABL1H396P，这种作用为非ATP竞争性的，IC50分别为0.8 nM, 2 nM, 1.4 nM, 5 nM, 和 4 nM。而且, DCC-2036也抑制SRC家族激酶SRC, LYN, FGR, 和 HCK, 和受体 TKs KDR, FLT3, 和TIE2，IC50分别为34 nM, 29 nM, 38 nM, 40 nM, 4 nM, 2 nM 和6 nM。DCC-2036作用于表达野生型或突变型BCR-ABL1的Ba/F3细胞，具有抗增殖活性，IC50为 2 nM到150 nM。此外, DCC-2036也抑制 Ph+细胞系K562(IC50 5.5 nM)增殖,且有效诱导表达BCR-ABL1的Ba/F3和K562细胞凋亡。最新研究显示DCC-2036通过显著抑制CML细胞系（与非CML白血病细胞系相比），而选择性抑制BCR-ABL阳性细胞。

体内研究

DCC-2036每天按100 mg/kg剂量口服饲喂给药携带Ba/F3-BCR-ABL1T315I白血病细胞的小鼠移植瘤模型，每天一次，有效抑制BCR-ABL1信号，且显著延长小鼠寿命。

Bafetinib (INNO-406)

MB3957

GNF-2

MB3959

PD173955

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.8064 mL

9.0320 mL

18.0639 mL

5 mM

0.3613 mL

1.8064 mL

3.6128 mL

10 mM

0.1806 mL

0.9032 mL

1.8064 mL

50 mM

0.0361 mL

0.1806 mL

0.3613 mL

ABL1激酶亚型实验和抑制效力检测:
通过与丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶系统耦合的激酶反应，得到ADP，而测定u-ABL1native活性。 使用分光光度计持续监测NADH 氧化。终反应混合物 (100 µL, 在384孔板中)制备如下: 在含0.1 % 辛基葡萄糖苷和 1 % DMSO, pH 7.5的90 mM Tris 中制备含 u-ABL1 激酶 (1 nM),ABLtide (EAIYAAPFAKKK, 0.2 mM), MgCl2(9 mM), 丙酮酸激酶 (~ 4 单元), 乳酸脱氢酶 (~ 0.7 单元), 磷酸烯醇式丙酮酸 (1 mM), 和NADH(0.28 mM)的 ABL1 激酶/偶联实验组分混合物。此外,制备含DCC-2036（在DMSO中连续稀释3倍 ）的抑制剂混合物，随后稀释到含MgCl2 (18 mM)和 0.2 %辛基葡萄糖苷 的180 mM Tris buffer中, pH 7.5。50 µL 抑制剂混合物与50 µL 上 述ABL1 激酶/耦合实验组分混合物混合，然后在30oC下温育2小时，然后加入2 µL 25 mM ATP (终浓度500 µM)开始反应。30oC下，在Polarstar Optima 或 Synergy2酶标仪上记录反应，每隔2秒钟记录一次，持续记录2.5小时。使用读数软件，在1到2小时计算反应速率（斜率）。通过比较反应速率与DMSO对照组，获得抑制百分数。使用 GraphPad Prism在一系列浓度抑制剂时测定一系列抑制百分数，而计算IC50值。ABL1T315I, p-ABL1native或ABL1H396P 的激酶实验与上述相同，除了使用2.2 nM ABL1T315I, 1 nM p-ABL1 native或1.3 nM ABL1H396P。实验格式也与上述相同，除了ABL1 中的TIE2,其使用荧光偏振/Transcreener格式。实验条件也与上述相同，除了使用PolyE4Y(终浓度为1 mg/mL) 作为底物，且预温育1小时。

细胞实验

• Cell lines: Ba/F3细胞和原代Ph+白血病细胞
• Concentrations: 0到10 μM
• Incubation Time: 72小时
• Method: Ba/F3 细胞或原代Ph+白血病细胞按一式三份接种在含实验混合物的96孔板上。72小时后,通过Resazurin或 MTT 试验测量存活细胞。细胞在培养基中稀释，然后加到96孔组织培养板上。细胞温育过夜，然后维持在37oC 下含 5% CO2的湿润环境下。第二天处理细胞。使用DCC-2036处理期间使用无血清培养基。使用MTT 测评细胞存活力。20 mL 储存 MTT 溶液等样加到含200 mL 培养基 (10%终溶液) 的每孔中，然后与细胞温育2小时。温育后，移除培养基，加入200 mL DMSO，溶解甲臜晶体。在550和690 nm处读取吸光值。对双波长(D550 到 D690)进行分析，提高测量的准确性。

动物实验

• Animal Models: BCR-ABL1native 或 BCR-ABL1T315I逆转录病毒静脉注射到同系 Balb/c小鼠
• Formulation: DCC-2036溶于0.5% CMC/1% Tween-80
• Dosages: ≤100 mg/kg
• Administration: 口服处理

Decamethonium Bromide是一种烟碱AChR部分激动剂和神经肌肉阻断剂。

靶点

nAChR 

体外研究

Decamethonium (Syncurine)是一种去极化肌肉松弛剂或神经肌肉阻滞剂，被用于麻醉以诱导麻痹。Decamethonium，作用时间短，与乙酰胆碱类似，作为烟碱样乙酰胆碱受体的部分激动剂发挥作用。在运动神经肌肉终板，它引起去极化，防止对乙酰胆碱从突触前末梢正常释放的进一步作用，并且因此防止神经刺激影响肌肉。在结合过程中，decamethonium实际上会激活(去极化)运动终板，但由于decamethonium本身不降解，细胞膜仍然去极化，并且对正常的乙酰胆碱释放无反应。

PNU-120596

MB1620

罗库溴铵

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.3907 mL

11.9534 mL

23.9069 mL

5 mM

0.4781 mL

2.3907 mL

4.7814 mL

10 mM

0.2391 mL

1.1953 mL

2.3907 mL

50 mM

0.0478 mL

0.2391 mL

0.4781 mL

392.38

化学式

C18H19F3N6O

CAS号

944842-54-0

稳定性

3 years -20°C powder

2 years -80°C in solvent

78 mg/mL (198.78 mM)

Ethanol

20 mg/mL warmed (50.97 mM)

Water

<1 mg/mL 难溶或者不溶

Decernotinib (VX-509)是一种有效的且选择性的JAK3抑制剂，Ki 为 2.5 nM，分别比作用于JAK1，JAK2，和 TYK2的选择性高4倍以上。Phase 2/3。

靶点

体外研究

在HT-2细胞中，Decernotinib抑制IL-2刺激的HT-2 STAT-5磷酸化，人T-细胞胚细胞增殖，和CD40L/IL-4–诱导的B细胞增殖。

体内研究

在胶原诱导的关节炎大鼠模型中，VX-509 (50 mg/kg, p.o.)导致裸关节肿胀和爪重量剂量依赖性减轻，并改善爪子组织病理学。在恶唑酮诱导的迟发性过敏小鼠模型中，VX-509 (50 mg/kg, p.o.)显著抑制耳朵水肿。在大鼠HvG模型中，VX-509 (50 mg/kg, p.o.)导致腘淋巴结(PLN)增生剂量依赖性抑制。

TESTS

SPECIFICATIONS

Appearance

White to off-white powder

Identification

UV

Solubility

30mg/ml (DMSO)

Purity(HPLC)

>99%

Defactinib (VS-6063, PF-04554878)是一种选择性，且口服有效的FAK抑制剂。

靶点

FAK

体外研究

在紫杉醇敏感的(SKOV3ip1)和紫杉醇耐药的(SKOV3-TR)细胞系中，VS-6063显著抑制pFAK (Tyr397)表达。VS-6063和紫杉醇结合协同减少增殖，增加SKOV3ip1，SKOV3-TR，HeyA8 和HeyA8-MDR细胞的凋亡。VS-6063 和Y15结合协同降低甲状腺癌细胞系的生存能力，集落形成，和细胞黏附。

体内研究

在PTX敏感和PTX耐药模型中，VS-6063 (50 mg/kg p.o.)与紫杉醇合用增强生长抑制作用。

紫杉醇

MB1178-S

紫杉醇（标准品）

MB3966

PF-00562271

MB2682

PF-562271

MB3968

PF-573228

MB3965

TAE226 (NVP-TAE226)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.9589 mL

9.7945 mL

19.5890 mL

5 mM

0.3918 mL

1.9589 mL

3.9178 mL

10 mM

–

–

–

50 mM

–

–

–

• Cell lines: SKOV3ip1，SKOV3-TR，HeyA8 和 HeyA8-MDR 细胞
• Concentrations: ~10 μM
• Incubation Time: 96 小时
• Method: 卵巢癌细胞用逐渐增加浓度的VS-6063处理96小时，然后进行MTT测定。结果通过重复三次实验证实。

动物实验：

• Animal Models: 负荷 SKOV3ip1，SKOV3-TR，HeyA8 或 HeyA8-MDR 肿瘤的小鼠
• Formulation: PBS
• Dosages: 50 mg/kg
• Administration: p.o.

Deferasirox是一种铁螯合剂，是cytochrome P450 3A4诱导剂，Cytochrome P450 2C8的抑制剂，Cytochrome P450 1A2抑制剂。

体外研究

Deferasirox 有效螯合来自Rhizopus oryzae 的铁离子，在浓度远低于临床上可实现的血清水平时，在体外对28／29的临床分离的Mucorales有作用。Deferasirox 诱导显著抑制NF-κB的活性，并在28／40的外周血样本中诱导它的活性亚单位p65的一个细胞质封存处于非活性形式。Deferasirox 可抑制3种人髓细胞系（K562，U937和HL60），其IC50在17-50 mM。Deferasirox 是cidal在体外抑制A. fumigatus，MIC和MFC分别时25 毫克/升和50 毫克/升。

体内研究

在糖尿病ketoacidotic或中性粒细胞减少小鼠中，Deferasirox 显著提高生存率并降低毛霉菌组织的真菌负担，脂质体amphotericin B有类似治疗效果。Deferasirox也增强了宿主对mucormycosis的炎症反应。Deferasirox和脂质体amphotericin B联用时协同提高生存率并降低毛霉菌组织的真菌负担。Deferasirox 口服给药大鼠，至少吸收75％，且生物利用度为26％。Deferasirox（静脉注射和口服）在血液循环主要在不变的形式和其铁络合物存在，Deferasirox有99.2％与血浆蛋白结合。Deferasirox 单药治疗小幅延长小鼠对IPA的生存。

地拉罗司(标准品)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.6784mL

13.3919mL

26.7838mL

5 mM

0.5357mL

2.6784mL

5.3568mL

10 mM

0.2678mL

1.3392mL

2.6784mL

50 mM

0.0536mL

0.2678mL

0.5357mL