555.55

化学式

C27H28F3N7O3

CAS号

1374640-70-6

稳定性

3 years -20°C powder

2 years -80°C in solvent

100 mg/mL (180.0 mM)

Water

<1 mg/mL 难溶或者不溶

Ethanol

<1 mg/mL 难溶或者不溶

Rociletinib (CO-1686, AVL-301)是一种不可逆的，选择性抑制突变型EGFR，在无细胞试验中作用于EGFRL858R/T790M和EGFRWT， Ki分别为21.5 nM和303.3 nM。Phase 2。

靶点

体外研究

CO-1686抑制突变体EGFR表达的细胞中的p-EGFR，IC50的范围为62 到187 nM，同时抑制EGFR磷酸化，在三个WT EGFR 表达的细胞中，IC50 > 2,000 nM。CO-1686选择性抑制NSCLC细胞表达的突变体EGFR的生长，GI50范围为7 到 32 nM，并诱导细胞凋亡。CO-1686抗性NSCLC细胞系表现出上皮间质转化的信号和对AKT抑制剂增加的敏感性

体内研究

在所有EGFR突变模型，以及人EGFRL858R-和EGFRL858R/T790M表达的转基因小鼠体内，CO-1686引起剂量依赖性的显著的肿瘤生长抑制。

Cobicistat (GS-9350) 是有效的CYP3A选择性抑制剂，IC50为30 – 285 nM。

靶点

CYP3A

IC50

30 – 285 nM

体外研究

Cobicistat (GS-9350)是有效的人类细胞色素P450 3A (CYP3A)酶的选择性抑制剂。GS-9350 抑制 CYP3A，IC50为 30 nM 到285 nM。与Ritonavir相比, GS-9350缺乏 抗HIV 活性,在MT-2 HIV感染实验中，作用于HIV-1蛋白酶IC50为>30μM，EC50为>30μM，所以GS-9350更适合用于促进抗HIV药物，在选择有潜力的抗HIV突变体的药物上没有风险。GS-9350显示降低药物相互作用的倾向，改善药物的耐受性比Ritonavir有效。

Abiraterone

MB7550

Galeterone (TOK001)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.2886 mL

6.4431 mL

12.8863 mL

5 mM

0.2577 mL

1.2886 mL

2.5773 mL

10 mM

0.1289 mL

0.6443 mL

1.2886 mL

50 mM

0.0258 mL

0.1289 mL

0.2577 mL

细胞色素 P450 抑制实验:
在人类肝微粒体组分中重复测定对细胞色素P450活性的抑制作用。反应条件与温育时间和肝微粒体蛋白浓度呈线性相关。底物浓度等于或低于在相同反应条件下测定的各自的Km值。使用特定的，内标准控制的HPLC MS/MS检测测定代谢物和/或底物的浓度。在形成代谢产物的反应过程中检测到有少于20％的底物消耗。除非另有说明，微粒体组分在磷酸钾缓冲液中稀释，然后与底物和抑制剂在37°C下预温育5分钟，加入NADPH反应系统开始反应，再在37°C下振荡温育。进行平行实验，检测酶选择性的阳性对照抑制剂。在适当时间，除去混合物的等分试样，加入有各自内部标准的甲醇和乙腈混合物终止反应。离心后的上清液等分试样进行HPLC-MS/MS分析。

秋水仙碱(标准品)

TESTS

SPECIFICATIONS

Appearance

White to almost white powder

Solubility

50mg/ml ethanol，clear

M.P.

150〜160℃

Absorbance ratio

(A243 / A350)

1.7〜1.9

Identification

HNMR

Purity(HPLC)

≥98.0%

产品描述

Combretastatin A4 是一种以 microtubule 为靶点的试剂，其与β-微管蛋白结合，Kd 为 0.4 μM。Phase 3。

靶点

体外研究

Combretastatin A4抑制MDA-MB-231，A549，Hela，HL-60，SF295，HCT-8，MDA-MB435，PC3M，OVCAR-8，NCI-H358M，和淋巴细胞的生长，IC50分别为2.8，3.8，0.9，2.1，6.2，5.3，7.9，4.7，0.37，8，和3.2 nM。1 μM Combretastatin A4抑制35%微管蛋白聚合，10 μM几乎完全阻断微管蛋白聚合。Combretastatin A4表现出高的相对结合能力，达到秋水仙碱结合力的78%。

体内研究

在NT2和MDA-MB-231乳腺肿瘤模型中，Combretastatin A4 (100 mg/kg, i.p.)诱导脂质R1显著减少，并通过电子顺磁共振(EPR)血氧定量法测得pO2下降。 Combretastatin A4 (100 mg/kg, i.p.)显著减少雄性NMRI小鼠的Ktrans。

激酶实验

使用 LC-MS/MS 的竞争性结合试验:

·         Colchicine (1.2 μ M)与微管蛋白(1.3 mg/mL)在培养缓冲液(80 mM PIPES，2.0 mM MgCl2，0.5 mM EGTA，pH 6.9)中于37℃下培养1小时。使用不同浓度(0.1− 125 μ M)的Combretastatin A4与原本结合微管蛋白的colchicine竞争。培育后，得到滤液。类似物抑制秋水仙碱结合的能力表示为不存在任何竞争物的对照组的百分比。

细胞实验

·         Cell lines: MDA-MB-231，A549，和 Hela 细胞

·         Concentrations: ~3.8 nM

·         Incubation Time: 72 h

·         Method: MDA-MB-231，A549，和HeLa细胞在DMEM培养基(115 units/mL 青霉素G，115 μg/mL 链霉素，和10%胎牛血清)中生长。细胞(5000 细胞/孔)接种于包含50 μL生长培养基的96孔板，培养24小时。移除培养基后，将100 μL包含不同浓度单个类似化合物的新鲜培养基加入到每个孔中，在37 ℃下培养72小时。培养24小时后，细胞中增补50 μL溶于DMSO(每个制剂中少于0.25%)的类似化合物。培养72小时后，加入20 μL刃天青培养2小时，然后在560 nm (激发波长)和590 nm (发射波长)下使用Victor微量滴定板荧光剂记录荧光。对照组为用最大量DMSO (0.25%)处理的细胞，活性为100%，IC50定义为与对照组相比，抑制50%细胞增殖的化合物浓度。

动物实验

·         Animal Models: 负荷 NT2 和 MDA-MB-231肿瘤的 FVB/N或裸的NMRI雄性小鼠

·         Formulation: DMSO

·         Dosages: 100 mg/kg

·         Administration: i.p.

细胞松弛素A

Cytochalasin A

MB5434

细胞松弛素B

Cytochalasin B

MB0783

细胞松弛素C

Cytochalasin C

MB0784

细胞松弛素D

Cytochalasin D

MB0785

细胞松弛素E

Cytochalasin E

MB0788

细胞松弛素H

Cytochalasin H

MB0807

二氢细胞松弛素B

Dihydrocytochalasin B

MB0767

Concanamycin A；Folimycin刀豆素A

Concanamycin A

MB0795

Chaetoglobosin A

Chaetoglobosin A

MB0766

4,9-Anhydrotetrodotoxin

4,9-anhydro-TTX

MB0804

Latrunculin A (LAT-A)

Latrunculin A (LAT-A)

CP-673451是一种选择性的PDGFRα/β抑制剂，无细胞试验中IC50为10 nM/1 nM，比作用于其他血管生成受体选择性高450倍以上，具有抗血管生成和抗肿瘤活性。

靶点

体外研究

CP-673451是一种选择性的PDGFRα/β抑制剂，IC50值为10 nM/1 nM，比作用于其他血管生成受体选择性高450倍以上。在恶性胶质肿瘤中，CP-673451 (33 毫克/千克)能够抑制>50%的PDGFR-β受体4小时，在血浆中Cmax下相应的EC50为120纳克/毫升。在海绵的血管生成模型中，CP-673451在3毫克/千克 (q.d. ×5, p.o.，在 Cmax下相应为5.5纳克/毫升)剂量下，抑制70%PDGF-BB刺激的血管生成。CP-673451通过降低GSK-3α和GSK-3β的磷酸化作用减少细胞增殖。在RD和RUCH2培养基中，CP-673451妨碍rhabdosphere形成能力和细胞的分化，导致衰老增加。

体内研究

CP 673451 (每天一次口服定量给药)在无胸腺小鼠体内抑制许多人类移植肿瘤，包括H460人类肺癌，Colo205和 LS174T 人类结肠癌，以及U87MG人类胶质母细胞瘤，在其皮下的生长(ED50 < 33毫克/千克)。再在RUCH2异种移植的小鼠体内，CP 673451减少了肿瘤的生长和间质细胞的浸润。

Telatinib

MB3947

CP-673451

MB5074

利尼伐尼；ABT869

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.3952 mL

11.9760 mL

23.9521 mL

5 mM

0.4790 mL

2.3952 mL

4.7904 mL

10 mM

0.2395 mL

1.1976 mL

2.3952 mL

50 mM

0.0479 mL

0.2395 mL

0.4790 mL

激酶抑制试验:
一个谷胱甘肽S-转移酶标记的激酶域，PDGFR-β (氨基酸693-1401，登记号. J03278)的细胞内部分在Sf-9(杆状病毒表达系统)细胞中表达。在逐渐增加ATP浓度的磷酸化缓冲液[50 mmol/L HEPES (pH 7.3)，125 mmol/L NaCl，24 mmol/L MgCl2 ，在预先涂有100 μL 100 μg/mL poly-Glu-Tyr (4:1 ratio) 的Nunc Immuno MaxiSorp 96孔板上，于PBS中稀释] 中培养酶进行酶动力学测定。在10分钟后，将板进行清洗（PBS，0.1%吐温20），加入抗-磷酸酪氨酸-辣根过氧化酶抗体，在PBS中稀释，0.05%吐温20，3%BSA，在室温下培养30分钟。将板按如上进行清洗，并加入3,3′,5,5′-四甲基联苯胺进行培养。加入等体积的0.09 NaH2SO4停止反应。随后磷酸酪氨酸依赖性的信号在450nm下于平板阅读器上定量测定。对于常规酶测定，酶在10 μM (终含量) ATP以及化合物存在下于DMSO (1.6% v/v DMSO assay final)中稀释，在室温下于板中培养30分钟，如上，板预先涂有100 μL 的6.25 μg/mL poly-Glu-Tyr。测定的其余部分如上所述，IC 50值的计算为对照组的抑制百分比。

细胞实验

• Cell lines: PAE
• Concentrations: ~3000 nM
• Incubation Time: 18分钟
• Method: 稳定表达完整PDGFR和VEGFR的PAE细胞已经生成。对基于细胞的选择性测定，PAE细胞转染完整的人类PDGFR-a，PDGFR-h，或VEGFR-2。细胞以每孔50微升4×105个细胞/毫升的生长培养基(Ham’s F-12培养基，以10%胚牛血清，青霉素和链霉素各50,000单位，500微克/毫升庆大霉素进行补充)接种于96孔板。6到8小时后，用50微升血清耗尽的培养基(如上，但含有0.1%胚牛血清)取代生长培养基，细胞培养过夜。在混合物加入之前，培养基立即用95微升血清耗尽的培养基取代。化合物在100%DMSO中稀释，并将其以DMSO中终浓度为0.25% v/v加入到细胞中，37°C下培养10分钟。用适当配体刺激细胞，按如上方法再培养8分钟。撤掉培养基，细胞用PBS清洗一次，然后将其于室温下在50微升HNTG缓冲液中[每25毫升含20 mmol/L HEPES (pH 7.5)，150 mmol/L NaCl，2% Triton X-100，10% 甘油，5 μmol/L EDTA，2 mmol/L NaVO4，和 1 个不含EDTA完整蛋白抑制片]裂解5分钟。随后裂解产物用50微升HG缓冲液[20 mmol/L HEPES (pH 7.5)，10%甘油]稀释。稀释的细胞裂解物完全混合，50微升上清液转移到ELISA捕获板，室温下搅拌培养2小时。ELISA捕获板通过在96孔ReactiBind山羊抗兔平板上涂覆100微升/孔的5微克/毫升兔抗人PDGFR-h，抗PDGFR-a，或抗VEGFR-2抗体进行60到90分钟制备。在2小时培养结束时，清洗板(PBS, 0.1% 吐温20)，再用抗-磷酸酪氨酸-辣根过氧化物酶抗体(在PBS,0.05%吐温20中稀释)在室温下培养30分钟。将板再次洗涤，然后用四甲基联苯胺培养，如上所诉进行评估。IC50值以对照组的百分比进行计算。

动物实验

• Animal Models: 无胸腺雌性大鼠
• Formulation: 5%甘油酯
• Dosages: 3, 10,或33毫克/千克
• Administration: 口服

CP-724,714是有效的，选择性HER2/ErbB2抑制剂，IC50为 10 nM,比作用于EGFR, InsR, IRG-1R, PDGFR, VEGFR2, Abl, Src, c-Met等选择性高640多倍。

靶点

HER2/ErbB2

IC50

10 nM

体外研究

CP-724,714明显选择性作用于EGFR，IC50为6.4 μM。CP-724,714作用于IR,IGF-1R,PDGFRβ,VGFR2,Abl，Src,c-Met，c-jun NH2端激酶(JNK)-2,JNK-3,ZAP-70,周期蛋白依赖激酶(Cdk)-2,和Cdk-5效果要低1000倍以上。CP-724,714作用于含erbB2激酶域的嵌合体，有效降低EGF诱导的自磷酸化，IC50为32 nM,但是作用于转染EGFR的NIH3T3细胞效果明显低很多。CP-724,714抑制erbB2增强的细胞，包括BT-474和SKBR3的增殖, IC50分别为0.25和0.95 μM。1 μM CP-724,714作用于BT-474细胞，诱导细胞在G1期累积，而在S期明显减少。CP-724,714可能通过肝细胞性损伤和胆汁淤积机制表现出肝毒性。CP-724,714抑制牛胆酸（TC）进入表达人类胆盐输出泵的膜囊泡，IC50为16 μM，且抑制胆小管, MDR1的主要外排转运，IC50为~28 μM。

体内研究

CP-724,714按25 mg/kg剂量口服处理FRE-erbB2和BT-474 移植瘤，快速吸收，且引起肿瘤erbB2 受体磷酸化降低。CP-724,714作用于皮下注射FRE-erbB2移植瘤的小鼠，诱导凋亡，按50 mg/kg剂量处理则显示肿瘤生长抑制达50%，且不会引起体重减轻或死亡。CP-724,714作用于MDA-MB-453,MDA-MB-231,LoVo(结肠),和Colo-205(结肠)移植瘤具有强抗癌活性。而且,CP-724,714按30或100 mg/kg剂量处理BT-474移植瘤，降低胞外信号调节激酶和Akt磷酸化。

特征

CP-724,714可用于治疗抗Trastuzumab的过量表达erbB2的肿瘤。

Mubritinib (TAK 165)

MB3985

TAK-285

MB3981

AEE788 (NVP-AEE788)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.1298 mL

10.6489 mL

21.2979 mL

5 mM

0.4260 mL

2.1298 mL

4.2596 mL

10 mM

0.2130 mL

1.0649 mL

2.1298 mL

50 mM

0.0426 mL

0.2130 mL

0.4260 mL

激酶实验:
在感染杆状病毒的Sf9细胞中表达的重组erbB2和EGFR细胞内域作为谷胱甘肽S转移酶融合蛋白。通过亲和层析纯化蛋白。用100 μL/孔0.25 mg/mL 聚(Glu:Tyr, 4:1), 溶于PBS的PGT在37oC温育而包被Nunc MaxiSorp 96孔板。移除多余的PGT，用冲洗buffer(溶于PBS 的0.1% Tween-20)冲洗3次。激酶反应在含125 mm NaCl, 10 mm MgCl2,0.1 mm原钒酸钠,1 mm ATP,和∼15 ng 重组蛋白的50 μL 50 mm HEPES (pH 7.4) 中进行。加入溶于DMSO的抑制剂,终DMSO浓度为2.5%。加入ATP开始磷酸化，在室温下持续震荡进行6分钟。加入反应混合物终止激酶反应，用冲洗buffer冲洗4次。和 50 μL/孔 HRP联合的-PY54自磷酸化抗体温育25分钟后测定磷酸化的PGT,稀释到0.2 μg/mL阻断buffer(溶于PBS的3% BSA,0.05% Tween-20)中。移除抗体，使用冲洗buffer冲洗4次。每孔加入 50 μL四甲基联苯胺过氧化物酶底物形成比色信号，然后每孔加入50 μL 0.09 m 硫酸终止。通过测量450 nm处的吸光值而测评形成的磷酸酪氨酸化产物。

细胞实验

• Cell lines: ZR-75-30,HCC-1419,MDA-MB-175,BT-474,SKBR3,MDA-MB-361,UACC-812,T-47D,MDA-MB-453,MDA-MB-468,CAMA-1,MDA-MB-157,MCF-7,MDA-MB-435,ZR-75-1,BT-20,和MDA-MB-231
• Concentrations: 0.1 nM 到10 μM
• Incubation Time: 6到7天
• Method: 细胞按每孔5~103个接种在24孔板上，重复2份。加入通过滴定6或者更多的从0.1 nM到 10 μM的稀释CP-724,714。对照组没有CP-724,714。细胞生长6到7天，计数存活细胞。 胰蛋白酶消化后,细胞转移到等中子异位素溶液中，使用Coulter Z2微粒计数器立刻计数。通过公式[(1−实验组浓度/对照组浓度)×100] 计数抑制生长情况。绘制剂量反应曲线，至少重复两次，取平均值。使用Calcusyn软件计算IC50值。

动物实验

• Animal Models: 携带FRE-erbB2 BT-474,MDA-MB-453,MDA-MB-231,LoVo(结肠),和 Colo-205(结肠)移植瘤的雌性无胸腺CD-1 nu/nu鼠
• Formulation: 0.5%甲基纤维素
• Dosages: ~100 mg/kg
• Administration: 口服处理

描述

CPI-444是一种有效的选择性Adenosine A2A receptor拮抗剂，它与A2AR结合，Ki值为3.54 nM，对A2AR的选择性比对其他腺苷受体亚型高50倍以上。

靶点

体外

CPI-444 restores T-cell activation in vitro.

体内

CPI-444 treatment resulted in a similar inhibition of tumor growth in the B16F10 melanoma (100 mg/kg) and RENCA renal cell cancer syngeneic models (10 mg/kg). It enhances T-cell activation in both the periphery and tumor microenvironment.

动物实验

Animal Models: C57BL/6 mice engrafted MC38 cells

• Formulation: —
• Dosages: 1, 10, or 100 mg/kg

Administration: oral gavage
(Only for Reference)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.4544 mL

12.2720 mL

24.5441 mL

5 mM

0.4909 mL

2.4544 mL

4.9088 mL

10 mM

0.2454 mL

1.2272 mL

2.4544 mL

50 mM

0.0491 mL

0.2454 mL

0.4909 mL

CPI-613是一种Lipoate类似物，在NCI-H460 细胞系中抑制线粒体酶pyruvate dehydrogenase (PDH)和α-ketoglutarate dehydrogenase，干扰肿瘤细胞线粒体代谢。

靶点

体外研究

在体外，CPI-613对多种肿瘤细胞系，包括H460人肺癌细胞和Saos-2 人肉瘤细胞，产生选择性毒性，EC50分别为120 μM 和120 μM。CPI-613干扰H460癌细胞线粒体代谢，包括以时间和药物剂量依赖的方式抑制PDH复合物活性和细胞膜电位损失。此外，在H460人肺癌细胞和Saos-2人肉瘤细胞中，CPI-613 (240 μM)也会诱导凋亡性和非凋亡性细胞死亡。

体内研究

CPI-613(25 mg/kg)在胰腺肿瘤细胞(BxPC-3)的人异种移植模型中具有有效的抗癌活性。同样的，CPI-613 (10 mg/kg)也会在H460人非小细胞肺癌小鼠模型中产生显著的肿瘤生长抑制作用。此外，CPI-613在预期治疗剂量范围内，在许多动物模型中产生很少，或没有副作用毒性，在小鼠体内具有100 mg/kg的最大耐受剂量。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.5734 mL

12.8670 mL

25.7341 mL

5 mM

0.5147 mL

2.5734 mL

5.1468 mL

10 mM

0.2573 mL

1.2867 mL

2.5734 mL

50 mM

0.0515 mL

0.2573 mL

0.5147 mL

• Animal Models: BxPC-3 和 H460 细胞皮下注射到CD1 nu/nu小鼠的背侧
• Formulation: CPI-613溶解于DMSO，然后在水中稀释
• Dosages: ≤25 mg/kg
• Administration: 腹腔注射

Crenolanib (CP-868596)是一种有效的，选择性PDGFRα/β抑制剂，在CHO细胞中Kd为2.1 nM/3.2 nM，也能有效抑制FLT3，对D842V突变型敏感对V561D突变型不敏感，作用于PDGFR比作用于c-Kit，VEGFR-2，TIE-2，FGFR-2，EGFR，erbB2，和Src的选择性高100倍以上。

靶点

体外研究

Crenolanib显著比imatinib有效，能够抑制对imatinib耐药的PDGFRα激酶(D842I，D842V，D842Y，D1842-843IM，和缺失I843)活性。Crenolanib作用于同基因模型系统中D842V，比imatinib有效135倍，IC50大约为10 nM。Crenolanib抑制EOL-1细胞中融合致癌基因的激酶活性，其衍生自慢性噬酸细胞白血病患者，且表达持续活化的FIP1L1- PDGFRα融合激酶，IC50 = 21 nM。Crenolanib也会抑制EOL-1细胞的增殖，IC50 = 0.2 pM。Crenolanib抑制在BaF3细胞中表达的V561D或D842V突变激酶的活化，IC50分别为85 nM或272 nM。Crenolanib抑制H1703非小细胞肺癌细胞系中PDGFRα活化，其能够使包含PDGFRα基因座的4q12区域扩增24倍，IC50为26 nM。Crenolanib是一种口服具有生物活性的，高度有效的，选择性PDGFR TKI。Crenolanib是苯并咪唑化合物，对PDGFRA和PDGFRB的IC50s分别为0.9 nM和1.8 nM。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.2546 mL

11.2729 mL

22.5459 mL

5 mM

0.4509 mL

2.2546 mL

4.5092 mL

10 mM

0.2255 mL

1.1273 mL

2.2546 mL

50 mM

0.0451 mL

0.2255 mL

0.4509 mL

PDGFRα激酶活性的生物化学评估:
中国仓鼠卵巢(CHO)细胞用突变型或野生型PDGFRα瞬时转染，用不同浓度的Crenolanib处理。涉及重组DNA的实验使用2级生物安全条件，根据指南进行。制备来自细胞系的蛋白质裂解物，使用抗PDGFRα抗体进行免疫沉淀反应，然后用于PDGFRα的连续免疫印迹。使用Photoshop软件进行密度测定以量化药物作用，磷酸-PDGFRα的水平标归一化到总蛋白质。密度测定法和增殖实验结果使用Calcusyn 2.1软件分析，以精确测定IC50值。使用Wilcoxon Rank Sum Test比较Crenolanib对给定突变体的IC50值。

细胞实验：

• Cell lines: EOL-1 细胞系
• Concentrations: 0-20 pM
• Incubation Time: 72小时
• Method: 将细胞以20, 000细胞/孔的密度加入96孔板，与Crenolanib培育72小时，然后使用2,3-bis[2-甲氧基-4-硝基-5-磺苯基]-2H-四唑-5-羰基苯胺 (XTT)-试验测量细胞增殖。