Tazemetostat (EPZ-6438)是一种有效的，选择性EZH2抑制剂，无细胞试验中Ki 和 IC50分别为2.5 nM 和 11 nM，比作用于EZH1选择性高35倍，比作用于14种其他HMT选择性高4500多倍。

特性

口服生物可利用的野生型和突变型EZH2选择性抑制剂。目前处于临床Ⅱ期试验，用于治疗弥漫性大B细胞性淋巴瘤。

靶点

体外研究

EPZ-6438浓度依赖性降低野生型或SMARCB1突变细胞中总体H3K27Me3水平，并引起去除SMARCB1的MRT细胞系中强的抗增殖作用， IC50范围为32 nM 到 1000 nM。EPZ-6438引起神经元分化的基因表达和细胞周期抑制，同时抑制Hedgehog通路基因，MYC 和 EZH2。在几种EZH2突变体淋巴瘤细胞中，EPZ-6438的抗增殖作用被氢化泼尼松或地塞米松增强。

体内研究

皮下注射 G401异种移植物的SCID小鼠体内，EPZ-6438引起肿瘤郁积，并且在给药期间，产生显著的肿瘤生长延迟，而对体重影响较小。

GSK126

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.7460 mL

8.7300 mL

17.4599 mL

5 mM

5 mM

0.3492 mL

1.7460 mL

10 mM

–

–

–

50 mM

–

–

–

生物化学法:
EPZ-6438与5 nM 40微升每孔的PRC2 (50微升中终测试浓度为4 nM ) 在1X试验缓冲液中(20 mM二羟乙甘胺酸 [pH 7.6]，0.002% Tween-20，0.005% Bovine Skin Gelatin 和0.5 mM DTT)培育30分钟。加入10微升每孔的底物混合物，以启动反应(基底以它们各自的Km值存在于最终反应混合物，即以一种被称为“平衡状态”的形式存在），底物混合物由试验缓冲液3 H-SAM，未标记的SAM，和代表包含C端生物素(附加到C端被酰胺包被的赖氨酸) 的组蛋白H3残基21-44的缩氨酸组成。基底的终浓度和基底肽的甲基化状态表明，每个酶反应在室温下培育90分钟，并用10微升每孔600 μM未标记的SAM淬灭，然后转移到384孔闪烁板，30分钟后进行洗涤。

细胞实验

• Cell lines: 突变细胞系(G401，A204，G402，KYM-1)，野生型细胞系(RD，293，SJCRH30)
• Concentrations: ~10 μM
• Incubation Time: 7天
• Method: 对于贴壁细胞系增殖测定法，每个细胞系的镀层密度基于生长曲线(由ATP含量测定)，由超过7天的时间过程来确定。化合物处理的前一天，细胞以一式三份接种于96孔板(进行0–7天)或6孔板(7 天后取代96孔板进行其余部分)。第0天，细胞是未处理的，DMSO处理的，或用起始浓度10 µM，和稀释3倍或4倍的EPZ-6438处理。板在第0天，第4天，第7天使用Cell Titer Glo读数，在第4天重新装满化合物/介质。第7天，将6孔板用胰蛋白酶处理，离心，重新悬浮在新鲜培养基中，通过Vi细胞计数。每种处理的细胞重复三份再以原始密度接种于96孔板中。细胞粘附到板上过夜，在第0天处理细胞。板在第7，11，和14天，使用Cell Titer Glo进行读数，在第11天重新装满化合物/介质。使用三个重复测试的平均值描绘增殖与时间进程的曲线，并计算IC50值。对于细胞周期和细胞凋亡，G401 与 RD细胞重复两份以每平板1 × 106个细胞接种于15-cm培养皿。细胞在1 µM EPZ-6438 下进行培养，总体积为25毫升，时间超过14天，细胞在第4，7，和11天被换为初始密度。细胞周期分析和TUNEL试验通过Guava流式细胞仪，按照生产商方案进行。

动物实验

• Animal Models: 皮下注射G401异种移植物的SCID小鼠。
• Formulation: 0.5% NaCMC 加 0.1% Tween 80 水溶液
• Dosages: ~500毫克/千克
• Administration: 口服给药

Erastin是一种ferroptosis激活剂，通过作用于线粒体VDAC而起作用，选择性作用于携带致癌基因RAS的肿瘤细胞。

靶点

Ferroptosis

体外研究

Erastin选择性致死致癌的Ras突变体细胞系，并触发独特的fe依赖性的称为ferroptosis的非凋亡细胞死亡。Erastin直接结合VDAC2并且使得通过NADH-依赖方式产生ROS导致线粒体损害，在一些表达激活突变的肿瘤细胞中，通过RAS-RAF-MEK途径诱导细胞死亡。此外，erastin通过诱导ROS介导的CID（胱天蛋白酶非依赖性细胞死亡），强烈增强了野生型EGFR细胞的作用。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.8280 mL

9.1401 mL

18.2802 mL

5 mM

0.3656 mL

1.8280 mL

3.6560 mL

10 mM

0.1828 mL

0.9140 mL

1.8280 mL

50 mM

–

–

–

• Cell lines: BJ-TERT/LT/ST/RASV12细胞
• Concentrations: 5 or 10 μg/mL
• Incubation Time: 6-11小时
• Method: BJ-TERT/LT/ST/RASV12细胞接种在100 mm平皿中，并使其生长过夜。细胞用erastin（5或10微克/毫升）处理6，8，或11小时。camptothecin处理（0.4微克/毫升）的对照被维持，在接种的时候处理20小时。处理后，细胞用胰蛋白酶/EDTA孵育并用含血清的新鲜培养基洗1次，然后用磷酸盐缓冲盐水洗涤两次。细胞同1×结合缓冲液重悬。100 μL重悬细胞在5μL的膜联蛋白V-FITC和碘化丙啶iodiode在黑暗中孵育15分钟。然后加入400 μl的1×结合缓冲液S并用流式细胞仪分析。采集数据，并使用CellQuest软件进行分析。只有不被碘化丙啶染色的活细胞使用FL1通道的膜联蛋白V-FITC染色分析。

TESTS

SPECIFICATIONS

Appearance

White powder

Identification

HNMR

Purity(HPLC)

≥98%

Erdosteine 是一种祛痰剂，用于治疗过多粘稠的粘液。

靶点

NF-κB

体外研究

Erdosteine是一种口服溶纤剂，用作各种慢性呼吸道疾病的祛痰剂。EdodoStin通过抑制脂多糖刺激的小鼠巨噬细胞中NF-κB的激活而发挥抗炎作用。然而，Erdosteine不抑制LPS诱导的Akt和MAPK通路的磷酸化。为了评价厄多司坦对巨噬细胞的毒性作用，分析了细胞活力。1, 10或100μg/mL厄多司坦治疗不产生可检测的细胞毒性。LPS(1μg/mL)诱导RAW 264.7细胞IκBα降解，10min后达到最大降解，用指示浓度的Erdosteine预处理RAW 264.7细胞6h，然后用LPS(1μg/mL)刺激10min。对IκBα基线值无影响。单独使用DMSO，其体积与厄尔多斯汀给药的体积相等，对IκBα的基线量没有任何影响。LPS处理10min可减少IκBα的量，而厄尔多斯汀预处理在一定浓度和时间能有效抑制IκBα的降解。

体内研究

将26只雄性小鼠分成如下四组：第1组，对照; 第2组，Erdosteine治疗; 第3组，甲氨蝶呤（MTX）治疗; 和第4组，甲氨蝶呤+ Erdosteine治疗。 在实验的第一天，向第3组和第4组腹膜内施用单剂量的甲氨蝶呤，尽管每日单剂量的厄多司坦口服给予第2组和第4组7天。 在实验结束时，移除动物的睾丸并称重。 甲氨蝶呤组的总抗氧化能力和总氧化应激水平以及髓过氧化物酶活性均高于对照组（p <0.05）。 与对照组相比，甲氨蝶呤组的脂质过氧化水平没有变化。 总之，厄多司坦可有效保护甲氨蝶呤诱导的睾丸毒性。 使用甲氨蝶呤的厄多司坦可改善睾丸损伤，如曲细精管中精子发生的表现所示。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

4.0111 mL

20.0554 mL

40.1107 mL

5 mM

0.8022 mL

4.0111 mL

8.0221 mL

10 mM

0.4011 mL

2.0055 mL

4.0111 mL

50 mM

0.0802 mL

0.4011 mL

0.8022 mL

• 小鼠巨噬细胞和单核细胞细胞株RAW264.7维护在杜尔贝科修改鹰年代介质层(DMEM)含10%胎牛血清,60 U /毫升青霉素,链霉素在37.8摄氏度和100μg /毫升5%的二氧化碳。用比色四唑化合物MTS测定细胞活力。简而言之,104细胞与不同浓度的孵化Erdosteine(1、10或100μg /毫升)24 h处理10μL MTS的解决方案(5毫克/毫升)45分钟。然后用异丙醇溶解细胞,和读取吸光度的波长540 nm。

动物实验

• 小鼠
• 二十六只雄性C57BL／6小鼠（8周，20～30g）随机分为四组。在对照组（n＝6）中，小鼠腹腔注射0.5毫升生理盐水作为安慰剂（腹腔注射）。在Erdosteine组（n＝6）中，用Erdosteine口服（灌胃，10 mg/kg）7天。在这项研究中，使用低剂量MTX，因为高剂量（20-40mg/kg）MTX具有抗炎和免疫抑制活性。MTX组（n＝7）用单剂量腹腔注射MTX（10 mg/kg）。MTX +厄多司坦组（n＝7），第一次注射小鼠腹腔注射MTX（10 mg/kg），给Erdosteine口服（10 mg/kg），开始第7天。最后一次给药后，所有大鼠禁食约12小时，但可以自由饮水。然后在实验结束时，用颈椎脱位处死动物。牺牲后，睾丸被迅速从小鼠体内移除。右睾丸标本固定在10%中性缓冲甲醛溶液组织学评估。

Erlotinib 是一种EGFR抑制剂，IC50 为 2 nM，对EGFR的敏感性比对人c-Src 或 v-Ab高1000多倍。

靶点

体外研究

Erlotinib HCl有效抑制完整细胞，包括HNS人头颈部肿瘤细胞(IC50 20nM)，DiFi人结肠癌细胞和MDA MB-468人乳腺癌细胞中EGFR活化。Erlotinib HCl (1 μM)在DiFi人结肠癌细胞中诱导细胞凋亡。Erlotinib抑制一组NSCLC细胞系，包括A549，H322，H3255，H358，H661，H1650，H1975，H1299，H596的生长，IC50范围为29 nM到>20 μM。Erlotinib HCl(2 μM)显著抑制AsPC-1和BxPC-3胰细胞生长。Erlotinib HCl与gemcitabine结合使用，在KRAS突变的胰腺癌细胞中具有协同作用。10微摩尔Erlotinib HCl抑制Y845 (Src依赖性磷酸化)和Y1068 (自身磷酸化)位点的EGFR磷酸化。结合Erlotinib HCl能够下调rapamycin刺激的Akt活性，并产生协同的细胞生长抑制作用。

体内研究

在100 mg/kg剂量下，Erlotinib HCl完全防止EGF诱导的异种移植人HN5肿瘤的无胸腺小鼠体内EGFR自身磷酸化，和治疗小鼠的肝EGFR自身磷酸化。Erlotinib HCl (100 mg/Kg)抑制H460a和A549肿瘤模型，分别具有71和93%的抑制率。

盐酸埃罗替尼

MB1096-S

盐酸埃罗替尼（标准品）

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.5417 mL

12.7084 mL

25.4168 mL

5 mM

0.5083 mL

2.5417 mL

5.0834 mL

10 mM

0.2542 mL

1.2708 mL

2.5417 mL

50 mM

0.0508 mL

0.2542 mL

0.5083 mL

激酶试验:
96孔板与100 μL/孔0.25 mg/mL PGT的PBS溶液在37℃下培养过夜进行涂层。过量PGT通过抽吸移除，板用洗涤缓冲液(0.1% Tween 20的PBS溶液)清洗3次。激酶反应在50 μL 50 mM HEPES (pH 7.3)中进行，反应液中包含125 mM 氯化钠，24 mM氯化镁，0.1 mM 原钒酸钠，20 μM ATP，1.6 μg/mL EGF，和15 ng从A431细胞膜亲和纯化的EGFR。加入Erlotinib HCl的DMSO溶液，终DMSO浓度为2.5%。磷酸化作用通过加入ATP起始，并在室温下恒定振荡进行8分钟。激酶反应通过抽吸反应混合物终止，并用洗涤缓冲液清洗4次。磷酸化的PGT通过与50 μL/孔HRP偶联的PY54抗磷酸酪氨酸抗体(在封闭缓冲液(3% BSA和0.05% Tween 20的PBS溶液)中稀释为0.2 μg/mL)培育25分钟进行测量。通过抽吸移除抗体，将板用洗涤缓冲液清洗4次。比色信号通过加入50μL /孔TMB微孔过氧化物酶底物产生，通过加入50 μL/孔0.09 M硫酸停止。磷酸酪氨酸通过测量450 nm下吸光度进行估计。对照组信号通常为0.6-1.2吸收单元，没有AlP，EGFR，或PGT的孔中基本上没有背景干扰，并且该信号与10分钟的培养时间成比例。

细胞实验

• Cell lines: A549，H322，H3255，H358 H661，H1650，H1975，H1299，H596 细胞
• Concentrations: 30 nM-20 μM
• Incubation Time: 72小时
• Method: 以指数生长的细胞以一式三份接种在96孔塑料板，并暴露于连续稀释的erlotinib，pemetrexed，或4:1固定浓度比的结合物，培养72小时。细胞活性通过细胞计数和MTT法测定。生长抑制表示为药物处理组与PBS处理的对照组细胞(认为100%存活)中存活细胞的百分比。IC50值是与未处理的对照组细胞相比，在药物中暴露72小时，导致50%细胞生长抑制的浓度，通过CalcuSyn软件计算。

动物实验

• Animal Models: 负荷HPAC细胞的雄性5周大的BALB-nu/nu小鼠
• Formulation: 6% Captisol
• Dosages: 50 mg/kg
• Administration: 口服给药

Etodolac 是COX抑制剂，IC50为53.5 nM。

靶点

体外研究

在离体兔关节软骨细胞中，Etodolac显著抑制ICl，TNFα活化的vol，以及随后的凋亡事件例如凋亡性细胞体积减小(AVD)和caspase-3/7活性的增高。

体内研究

在机械异常性疼痛的小鼠模型中，Etodolac通过COX-依赖性途径衰减paclitaxel引起的周围神经病变。在佐剂关节炎大鼠中，Etodolac和其他NSAID以剂量依赖的方式抑制足肿胀，引起胃黏膜损伤。在关节炎大鼠中，Etodolac表现出最高的UD（50）值和安全性指标。除了当其作用是由在正常大鼠中醋酸诱导的扭体评估，Etodolac表现出最高的UD（50）值和安全性指标。在佐剂关节炎大鼠中，Etodolac剂量依赖性抑制胃癌的发展，并30毫克/千克/天剂量时没有癌症检测到。在Helicobacter pylori (Hp)感染的蒙古沙鼠（MGS）的胃中，Etodolac不影响炎性细胞浸润或氧化性DNA损伤的程度，但是它显著抑制粘膜细胞的增殖并剂量依赖性抑制肠上皮组织转化的发展。在CCI大鼠中，Etodolac减轻热诱发痛觉过敏并阻断CCI侧TRAP阳性多核破骨细胞数的增加，但是，它不抑制CCI侧骨矿物质含量（BMC）和骨矿物质密度（BMD）上的的降低。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.4801 mL

17.4004 mL

34.8008 mL

5 mM

0.6960 mL

3.4801 mL

6.9602 mL

10 mM

0.3480 mL

1.7400 mL

3.4801 mL

50 mM

0.0696 mL

0.3480 mL

0.6960 mL

TESTS

SPECIFICATIONS

Appearance

White crystalline powder

Solubility

50mg/ml Ethanol,clear

M.P

144~150℃

Identification

UV

Purity (HPLC)

≥98%

Etomidate是一种GABAA受体激动剂， 用作短效的麻醉剂或者安定剂。

靶点

GABAA receptor 

体外研究

在alpha2B受体表达HEK293细胞中，Etomidate迅速增加胞外信号相关激酶ERK1/2的磷酸化水平。Etomidate，通过增加alpha5GABAAR活性，完全阻断长时程增强和受损的记忆，而这些作用被预处理的L-655708逆转。Etomidate直接激活嗜铬细胞中的GABA（A）受体，从而提高钙离子浓度。Etomidate通过正负离子平衡电位和去极化来调节嗜铬细胞的GABA（A）的受体激活。Etomidate（3-100 mM）以时间和浓度依赖的方式抑制谷氨酸摄取,一半最大效应发生在2.4 mM。Etomidate导致V（最大值）显著减少，而转运子的K（m）未受影响。

体内研究

在野生型小鼠中，Etomidate导致动脉血压的一个短暂的增加。在慢性低氧大鼠中，Etomidate（0.1 mM）也抑制CH气管环收缩响应于CCh发送和KCl累积浓度。在慢性低氧大鼠中，Etomidate和ketamine衰减响应于乙酰胆碱和缓激肽的肺血管舒张，而对A23187的反应没有影响。在犬肺动脉血管中，Etomidate和ketamine进一步削弱对L-NAME和TBA有抗性的松弛。

依托咪酯(标准品)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

4.0935 mL

20.4675 mL

40.9350 mL

5 mM

0.8187 mL

4.0935 mL

8.1870 mL

10 mM

0.4093 mL

2.0467 mL

4.0935 mL

50 mM

0.0819 mL

0.4093 mL

0.8187 mL

Etomoxir 是一种有效的肉毒碱棕榈酰基转移酶 (carnitine palmitoyltransferase-I，CPT-1) 抑制剂。

靶点

CPT-1 

体外研究

Etomoxir不可逆地结合到CPT-1抑制其活性的催化位点，但也上调脂肪酸氧化酶。 Etomoxir是作为线粒体肉碱棕榈酰基转移酶-1（CPT-1）的抑制剂开发的，位于线粒体外膜上。 Etomoxir在肝脏中可以作为过氧化物酶体增殖物，增加DNA合成和肝脏生长。因此，除了作为CPT1抑制剂之外，还可以将etomoxir视为PPARα激动剂。 Etomoxir是环氧乙烷羧酸肉碱棕榈酰转移酶I抑制剂的成员，并且已被认为是治疗心力衰竭的治疗剂。急性Etomoxir治疗不可逆地抑制肉碱棕榈酰转移酶I的活性。结果，脂肪酸进入线粒体和β-氧化降低，而胞质脂肪酸积累并且葡萄糖氧化升高。与Etomoxir长时间孵育（24 h）会对几种代谢酶的表达产生不同的影响

体内研究

Etomoxir是游离脂肪酸（FFA）氧化相关关键酶CPT1的抑制剂。 P53与Bax直接相互作用，Bax受Etomoxir抑制，进一步证实了P53和Bax的直接相互作用以及db / db小鼠中介导的FAO介导的线粒体ROS生成。 大鼠每日注射Etomoxir（一种特异性CPT-1抑制剂），以20mg / kg体重持续8天。 Etomoxir处理的大鼠显示心脏CPT-1活性降低44％。 用20mg / kg Etomoxir治疗Lewis大鼠8天不会改变血糖，这与可比的依托咪酯喂养研究相符。 同样，Etomoxir喂养不影响一般生长特征，如体重增加，也不会影响后肢肌肉质量。 然而，在Etomoxir治疗的大鼠中，心脏质量和肝脏肿块均显着增加了11％。

(+)-Etomoxir sodium salt；Etomoxir sodium;R)-(+)-乙莫克舍钠盐

MB3406

Perhexiline maleate

MB1126

盐酸伊立替康,(CPT-11)

MB5023

2-氯-5-硝基苯甲酰苯胺;GW 9662

MB3813

GSK3787

MB3709

GW0742

MB7303

GW501516

MB4844

L-165041

MB3812

T0070907

MB1227

Streptozocin；糖尿病建模剂

MB0041

阿脲；四氧嘧啶(用于糖尿病造模)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.0598 mL

15.2989 mL

30.5979 mL

5 mM

0.6120 mL

3.0598 mL

6.1196 mL

10 mM

0.3060 mL

1.5299 mL

3.0598 mL

• 将Etomoxir溶于DMSO并储存，然后在使用前用适当的培养基稀释。

将大鼠心脏H9c2成肌细胞在含有10％胎牛血清的DMEM中温育直至接近汇合。在一些实验中，在存在或不存在1-80μMEtomoxir的情况下，用DMEM（无血清）将细胞预培养2小时，然后用0.1mM [1-14C]油酸（10μCi/培养皿，以1：1的摩尔比结合BSA）。在其他实验中，将细胞预培养2小时加或减40μMEtomoxir，然后用0.1μM或0.1mM [1,3-3H]甘油（10μCi/培养皿），0.1mM [1-14C]培养2小时，油酸（2μCi/皿，以1：1摩尔比结合BSA），0.1mM [1-14C]棕榈酸（2μCi/皿，以1：1摩尔比结合BSA），28μM[ 3H]乙醇胺（2μCi/培养皿），28μM[甲基-3H]胆碱（2μCi/培养皿），0.4mM [3 H]丝氨酸（20μCi培养皿）或40μM肌醇[10μCi /碟）。除去培养基，细胞用冰冷的盐水洗涤两次，然后用2mL甲醇 – 水（1:1，v / v）从培养皿中收获用于脂质提取。取等分试样的匀浆用于测定细胞中放射性的总摄取量。然后分离磷脂并确定其中的放射性

动物实验

• 将Etomoxir溶于0.9％（w / v）NaCl中。
• 小鼠
• 使用80只雄性C57BLKS / J lar-Leprdb / db小鼠和20只野生型同窝小鼠（8周）。 db / db小鼠随机分为四组：db / db组，Etomoxir组，MitoQ组和PFT-α组。在Etomoxir组中，小鼠每周两次腹膜内注射1 mg / kg Etomoxir。在MitoQ组中，将50μMMitoQ给予水中的小鼠。装有MitoQ的水瓶盖上铝箔，所有瓶子每3天重新灌装一次。在PFT-α组中，小鼠每周两次腹膜内注射1mg / kg PFT-α。 WT小鼠改为用赋形剂施用。实验期为8周。最后，收集外周血样品和骨髓细胞用于测定。
• 大鼠
• 本研究中使用体重150-200克的雄性Lewis大鼠。将动物保持在12小时：12小时光照/黑暗周期并随意喂食Purina Chow饮食和水。将大鼠分成两组：（1）对照和（2）Etomoxir。将Etomoxir（20mg / kg体重）溶于0.9％（w / v）NaCl中并腹膜内施用8天。对照大鼠接受盐水。实验前24小时给予最后一次注射。腹膜内注射戊巴比妥和肝素（3：1）混合物麻醉动物。随后，取出心脏进行LCFA摄取研究并分析转运蛋白含量。

Etoposide是一种鬼臼毒素的半合成衍生物，通过抑制topoisomerase II 活性而抑制DNA合成。

靶点

体外研究

Etoposide通过与Topoisomerase II 和 DNA形成复合物而抑制DNA合成，诱导双链DNA断裂，且阻碍通过 Topoisomerase II结合修复。DNA持续断裂阻碍进入细胞有丝分裂期，进而导致细胞死亡。Etoposide主要作用于细胞周期的G2期和S期。Etoposide 抑制鼠类血管肉瘤细胞系 (ISOS-1) 生长，IC50 为0.25 μg/mL。Etoposide 抑制人类白血病成淋巴细胞系CCRF-CEM的四倍体克隆，IC50为0.6 μM。

体内研究

Etoposide 作用于Lewis 肺癌，诱导肿瘤免疫。Etoposide按50 mg/kg剂量单独腹腔注射给药注射了Lewis肺癌细胞 (3LL)的C57B1/6小鼠，诱导60%存活。

Topoisomerase II 活性测定:
制备核提取物，进行核分离。在Topoisomerase II去连环过程中获得去连环百分数而计算Topoisomerase II的活性。氚标记的kinoplast DNA (KDNA 0.22 μg)作为底物。Etoposide 与 Topoisomerase II在37°C 下温育30分钟，然后加入1%十二烷基硫酸钠（SDS）和蛋白酶K（100 μg/mL）终止。通过Etoposide获得去连环百分数和 Topoisomerase II 抑制情况。

细胞实验：

• Cell lines: 人类胶质瘤细胞系CL5
• Concentrations: 80 μg/mL
• Incubation Time: 1 小时
• Method: Etoposide处理后，使用含有0.03％胰蛋白酶和0.27 mM乙二胺四乙酸（EDTA）的磷酸盐缓冲液（PBS）将细胞从培养皿中移去，然后在培养皿中稀释到适当数目，获得20到200个菌落。12天后，使用甲醇-乙酸固定培养基，使用结晶紫进行染色，并计数超过50个细胞的菌落。

动物实验：

• Animal Models: 携带血管肉瘤移植瘤ISOS-1 的小鼠
• Formulation: 生理盐水
• Dosages: 10 mg/kg
• Administration: 从实验第7天开始，每天腹腔注射，持续5天

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.6991 mL

8.4953 mL

16.9906 mL

5 mM

0.3398 mL

1.6991 mL

3.3981 mL

10 mM

0.1699 mL

0.8495 mL

1.6991 mL

50 mM

0.0340 mL

0.1699 mL

0.3398 mL

TESTS

SPECIFICATIONS

Appearance

White or white crystalline powder

Solubility

50mg/ml DMSO

Identification

HNMR/UV

Specific rotation

-110°~-118°

Water

≤6.0%

Purity(HPLC)

≥98%